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1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文大腸癌相關(guān)抗原LEA的臨床病理診斷應用研究姓名:馮慧申請學位級別:碩士專業(yè):細胞生物學指導教師:宋今丹2001.4.1度,間接免疫熒光法和間接ELISA法測定活性和特異性。免疫組織化學(S一P法)研究LEA和CEA在人體大腸腫瘤、病變及正常組織中的表達。免疫細胞化學和流式細胞儀觀察和分析LEA和CEA在大腸癌細胞系的表達。采用r檢驗和方差分析,計算檢測的靈敏度、特異度、準確度、預斷值、似然比、可靠度。實驗結(jié)果腹水
2、效價為10一‘,純化后濃度為1.98m歲mlND一1的效價為10一‘,SDS一PAGE電泳在MW55000和MW2500()處顯示為均一的兩條帶,純度較好。間接ELISA和間接免疫熒光結(jié)果表明,與抗CEA單抗相比ND一1單抗對大腸痛細胞具有很強的特異性結(jié)合力(P0.01),免疫細胞化學染色表明LEA分布在大腸癌細胞系的細胞膜表面。FACS檢測LEA抗原在CCL一187CX一1,CloneA,和CCL一229細胞表達的陽性峰平均熒光強度呈
3、遞減趨勢,并且強于CEA的表達JR.LEA在高分化大腸癌細胞系高度表達,并且低侵襲表達盤高于高俊襲細胞。LEA與CEA在大腸瘩組織內(nèi)的分布呈明顯的異質(zhì)性,痛組織分化程度越高,LEA表達的陽性率及陽性強度也越高,LEA對高分化腺癌表現(xiàn)出更高的選擇性。與CEA相比,LEA在非瘍組織中表達的陽性率較低。LEA在腺瘤中表達的陽性率,明顯高于廟旁粘膜和正常粘膜。LEA在正常粘膜、痛旁粘膜、大腸腺瘤、大腸痛組織中的陽性表達呈遞增趨勢,.LEA在正常
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