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1、目的: 探討CYP1B1基因缺失孕鼠接受糖皮質(zhì)激素刺激后其子代對(duì)青光眼的易感性。 方法: CYP1B1基因缺失小鼠為試驗(yàn)組,C57BL /6J小鼠作為對(duì)照組。取9-10周齡CYP1B1基因缺失雌鼠30只,雄鼠15只,分成15籠,每籠2只雌鼠1只雄鼠于下午五點(diǎn)配對(duì)合籠,第二天早上九點(diǎn)取出雄鼠,觀察雌鼠有陰栓者(表明已受孕)單獨(dú)標(biāo)記,共有14只雌鼠受孕,并隨機(jī)將受孕雌鼠分成兩組,每組7只,根據(jù)雌鼠體重分別按0.05m
2、l/10g(試驗(yàn)組一)和0.1ml/10g(試驗(yàn)組二)分別對(duì)兩組進(jìn)行腹腔注射0.5%地塞米松,連續(xù)注射12天,即在其孕早期及孕中期給予地塞米松腹腔注射。雌鼠孕19-21天娩出幼鼠,22天斷奶,實(shí)驗(yàn)組一中出生并存活的幼鼠有26只,實(shí)驗(yàn)組二中僅1只孕鼠生產(chǎn)且為死胎。C57BL /6J小鼠的分組方法及處理方法與CYP1B1基因缺失鼠相同,其實(shí)驗(yàn)組一中有18只雌鼠受孕,參照CYP1B1基因缺失鼠將其分為0.05ml/10g組(對(duì)照組一)和0.1
3、ml/10g組(對(duì)照組二),對(duì)照組一中出生并存活的幼鼠有30只,對(duì)照組二中未有幼鼠存活。因此本試驗(yàn)僅針對(duì)腹腔注射0.05ml/10g劑量地塞米松的CYP1B1基因缺失鼠和C57BL /6J小鼠做出比較和分析。分別選取20只CYP1B1基因缺失幼鼠和C57BL /6J幼鼠作為研究對(duì)象,檢測(cè)幼鼠的角膜橫徑、眼壓后,將幼鼠隨機(jī)分成兩組,每組10只,取其雙眼眼球分別做塑料切片進(jìn)行光鏡觀察和進(jìn)行視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(TUNEL)。 結(jié)
4、果: 試驗(yàn)組小鼠角膜橫徑為2.98±0.18mm,對(duì)照組為2.96±0.21mm,試驗(yàn)組較對(duì)照組無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。試驗(yàn)組小鼠眼壓19.6±2.6mmHg,對(duì)照組為16.4±3.0mmHg,試驗(yàn)組較對(duì)照組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。光鏡觀察發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組小鼠視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)中,神經(jīng)纖維層較薄,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞體體積縮小,胞漿空泡化明顯,胞核中染色質(zhì)邊集,部分核溶解,而實(shí)驗(yàn)組較少出現(xiàn)這種情況。TUNEL染色顯示:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照
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