版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、皮膚缺損的修復(fù),尤其是慢性創(chuàng)面,難愈性潰瘍創(chuàng)面,全層大面積缺損的治療,一直是整形外科和燒傷外科經(jīng)常遇到的難題,臨床上多采用各種自體皮片、異體皮膚或皮瓣移植修復(fù),其不僅造成供區(qū)新的創(chuàng)傷,有時(shí)還存在著供皮來源限制,供區(qū)繼發(fā)性損傷大,異體皮膚移植引起免疫排斥反應(yīng)等眾多問題。隨著組織工程技術(shù)研究的深入,應(yīng)用組織工程皮膚修復(fù)皮膚缺損是目前皮膚缺損修復(fù)研究的熱點(diǎn)之一,各國專家學(xué)者都研究了許多種構(gòu)建組織工程皮膚的方法,為臨床解決皮膚缺損的修復(fù)提供了新
2、的思路。盡管目前已有的組織工程化皮膚,已具有與正常皮膚類似的結(jié)構(gòu)及屏障功能,應(yīng)用于臨床取得了一定療效,但是很多組織工程皮膚產(chǎn)品仍不成熟,距理想的組織工程皮膚尚有不少差距,存在自體種子細(xì)胞來源缺乏、異體種子細(xì)胞誘發(fā)免疫排斥反應(yīng)、體外培養(yǎng)時(shí)間長、缺乏血管、治療費(fèi)用貴等缺點(diǎn)。因此,有必要去探索構(gòu)建一種新型的具有良好應(yīng)用前景的組織工程皮膚。 目的:研制一種新型的組織工程支架——自體血漿纖維蛋白,將取自自體皮膚培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞及表皮細(xì)胞分
3、別接種自體血漿制成的支架上,構(gòu)建一種組織工程皮膚樣復(fù)合物。并將該組織工程支架移植于動(dòng)物筋膜層,觀察支架與組織的融合及毛細(xì)血管的生長情況,探討該組織工程皮膚樣復(fù)合物修復(fù)全層皮膚缺損的可行性。 方法:1.采集大鼠自體的血漿與纖維蛋白原融合后制成固態(tài)的血漿纖維蛋白支架,行形態(tài)學(xué)觀察及物理學(xué)及生物學(xué)評價(jià)。2.取大鼠自體皮膚,通過酶消化法分離表皮與真皮層,原代培養(yǎng)表皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞,用免疫熒光技術(shù)進(jìn)行CK及波形絲蛋白的鑒定及形態(tài)學(xué)觀察。
4、3.將第3-5代的成纖維細(xì)胞及表皮細(xì)胞接種于血漿纖維蛋白支架上,構(gòu)建組織工程皮膚樣復(fù)合物,行HE及電鏡觀察。ELISA法測定成纖維細(xì)胞培養(yǎng)液中TGF—B1、bFGF含量。4.將血漿蛋白支架移植到大鼠皮下筋膜層,觀察蛋白支架內(nèi)毛細(xì)血管生長情況,分別取第3,5,7,14,21,28天的全層皮膚行組織學(xué)、免疫組織化學(xué)觀察。 結(jié)果:1.制備的血漿纖維蛋白膠呈清亮暗紅色,表面有光澤,可輕松從圓玻片上剝下來,用鑷子鑷起,形狀規(guī)則,圓形,直徑
5、約1.3cm。HE呈嗜伊紅染色,染色均勻,電鏡可以觀察到顯著的網(wǎng)狀多孔結(jié)構(gòu)。支架的降解速度適宜種子細(xì)胞的生長完全,且微生物學(xué)檢測陰性。2.角質(zhì)形成細(xì)胞及成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)良好,均貼壁生長。CK及波形絲蛋白免疫熒光染色,表現(xiàn)為陽性反應(yīng)。3.角質(zhì)形成細(xì)胞及成纖維細(xì)胞在血漿纖維蛋白支架上生長良好,光鏡下可見細(xì)胞間連接緊密,HE染色顯示細(xì)胞鋪滿支架表面,電鏡顯示細(xì)胞已長入支架內(nèi)部。4.血漿蛋白支架植入大鼠皮下筋膜層后,創(chuàng)面愈合良好,未見排斥反應(yīng)
6、,HE染色見少許炎癥細(xì)胞浸潤,移植5天后可見新生內(nèi)皮細(xì)胞芽,7天后可見毛細(xì)血管管狀結(jié)構(gòu),加入VEGF的支架血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長速度明顯快于不加VEGF的支架。 結(jié)論:利用自體血漿制備的纖維蛋白支架無毒性,來源方便,制備簡單,費(fèi)用低廉,可以作為一種新型的組織工程支架。自體的角質(zhì)形成細(xì)胞及成纖維細(xì)胞接種在此支架上生長良好,能很快鋪滿全層,說明為種子細(xì)胞的生長提供了有利的基質(zhì)。血漿纖維蛋白膠植入大鼠筋膜層,可見膠中有新生血管樣結(jié)構(gòu)長出證
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 轉(zhuǎn)瓶中組織工程骨軟骨復(fù)合物的動(dòng)態(tài)構(gòu)建.pdf
- 組織工程皮膚替代物的研制與應(yīng)用.pdf
- 轉(zhuǎn)基因CHO復(fù)合仿生支架體外構(gòu)建組織工程皮膚研究.pdf
- 復(fù)合型組織工程化自體皮膚體外快速構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 毛囊細(xì)胞與組織工程皮膚的構(gòu)建.pdf
- 殼聚糖膠原復(fù)合物用于人腮腺組織工程構(gòu)建的初步研究.pdf
- 牙周組織工程中殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復(fù)合物的應(yīng)用研究.pdf
- 自體組織工程神經(jīng)構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 靜電紡絲素蛋白-BAMG搭載VEGF構(gòu)建復(fù)合組織工程支架.pdf
- 組織工程材料制備、支架構(gòu)建與評價(jià)的若干研究.pdf
- 基于絲素蛋白-瓊脂糖復(fù)合支架材料的骨組織工程應(yīng)用研究.pdf
- 組織工程神經(jīng)復(fù)合物的構(gòu)建及其移植修復(fù)大鼠脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 人BMSCs體外復(fù)合自體DBM構(gòu)建組織工程軟骨的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 組織工程皮膚構(gòu)建及其臨床應(yīng)用研究.pdf
- 組織工程化皮膚支架與創(chuàng)面敷料的研究.pdf
- 膠原-殼聚糖-纖維蛋白膠不對稱支架的制備及其在組織工程皮膚構(gòu)建中的應(yīng)用.pdf
- 組織工程骨構(gòu)建策略及自體濃縮骨髓血復(fù)合支架修復(fù)齒槽嵴裂的臨床研究.pdf
- 基于牛膠原蛋白復(fù)合支架的組織工程人前板層半角膜的體外構(gòu)建及其鑒定研究.pdf
- 絲素蛋白-殼聚糖復(fù)合納米纖維用于皮膚組織工程.pdf
- 同種異體脫蛋白骨復(fù)合纖維蛋白膠構(gòu)建骨組織工程支架的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
評論
0/150
提交評論