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文檔簡介
1、急性淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)是小兒腫瘤中最常見的疾病,占整個兒童白血病的80[%]左右。到目前為止,盡管白血病的發(fā)病分子機(jī)制仍不清楚,但學(xué)術(shù)界普遍認(rèn)為,白血病的發(fā)病與環(huán)境及遺傳等因素有關(guān),癌基因(Oncogene)和抑癌基因(TSG)在腫瘤發(fā)生中扮演著重要角色。已證實細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)歸是癌基因活化或(和)TSG失活的結(jié)果。而且在許多組織中,TSG的失活是腫瘤生成的主要機(jī)制。發(fā)現(xiàn)新的TSG,將正常的TSG導(dǎo)入白血病細(xì)胞中,去代替或補(bǔ)償缺失或
2、突變的TSG,是目前白血病基因治療的新策略之一。 細(xì)胞遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)的研究表明,幾乎所有的腫瘤細(xì)胞都存在染色體片段的非隨機(jī)性丟失。這意味著這些丟失的片段中可能包含著某些與腫瘤發(fā)生相關(guān)的基因。兒童ALL在多條染色體上存在雜合性缺失(LOSS ofHeterozygosity,LOH),6號染色體長臂(6q)是ALL中最常出現(xiàn)LOH的區(qū)域之一。在ALL中已證實了一些共同缺失區(qū):6q12-21、6q14-2l、6q21、6q21-
3、22、6q21-23、6q23、6q23-24、6q23.1-27及6q25-27。報道的幾個常見的6q最小缺失區(qū)(RegionsofMinimal Deletion,RIVID)均包括6q21帶,提示可能有TSG定位于這個區(qū)域內(nèi)。國外研究報道,在6q21的微衛(wèi)星位點D6S1709-D6S434附近區(qū)域存在高頻率的等位基因LOH,本實驗室的前期研究采用更高密度的微衛(wèi)星位點分析發(fā)現(xiàn)在D6S1709-D6S301之間存在一個2cM的最小共同
4、缺失區(qū),上述研究表明,在此最小區(qū)域內(nèi),可能存在一個或多個TSG。 細(xì)胞周期蛋白C(CyclinC,CCNC)是發(fā)現(xiàn)較晚的一類細(xì)胞周期蛋白,位于6q21,目前對其在細(xì)胞周期中的作用研究不多,初步的功能研究表明CCNC參與了細(xì)胞周期G<,l>/S期的轉(zhuǎn)換,也有學(xué)者認(rèn)為CCNC在G。期末表達(dá)達(dá)到最高水平,故認(rèn)為C是G。期的調(diào)節(jié)蛋白,在人類細(xì)胞再進(jìn)入細(xì)胞周期中起著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。 并作為1a<,,25>(OH)<,2>D<,3>
5、的靶基因之一,與其調(diào)節(jié)細(xì)胞生長的功能密切相關(guān)。有學(xué)者對具有6q缺失的兒童ALL的CCNC的表達(dá)進(jìn)行檢測后發(fā)現(xiàn)了90%以上的患兒存在有CCNC的表達(dá)缺失,并推測CCNC可能是兒童ALL中的一個重要的TSG,但目前為止,對于CCNC在兒童ALL的發(fā)病中所起的作用及作用機(jī)制如何,尚缺乏研究。我們的實驗通過探討CCNC在兒童ALL中的表達(dá),希望明確其在白血病發(fā)病中所起的作用并初步研究其可能的作用機(jī)制。 本實驗用實時熒光定量PCR檢測了C
6、CNC在兒童ALL及正常小兒骨髓中的mRNA表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn),癌旁組織(34.4%、31.2%)與良性肺組織(12.5%、18.7%);在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織中:DDH與VEGF陽性表達(dá)率較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織高,在I、Ⅱ期肺癌組織中兩者的表達(dá)陽性率低于Ⅲ期組織,與其它臨床特征無關(guān);轉(zhuǎn)染反義DDH<,2>寡核苷酸后,細(xì)胞中DDH2mRNA和蛋白水平均明顯低于兩對照組;實驗組A549細(xì)胞的存活率明顯低于兩對照組;注射反義DDH<,2>寡
7、核苷酸的裸鼠腫瘤的體積與重量均明顯低于對照組。 結(jié)論:非小細(xì)胞肺癌患者血清DDH濃度明顯高于非腫瘤患者,手術(shù)前后其血清濃度有明顯的變化,其可能可作為非小細(xì)胞肺癌的腫瘤標(biāo)志物;DDH與VEGF在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁組織與肺的良性病變組織,兩者可能參與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生與增值,而且兩者之間可能有一定的相關(guān)性;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤組織中DDH與VEGF表達(dá)較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤組織高,兩者可能與非小細(xì)胞肺癌的淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān);
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