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文檔簡介
1、目的:
通過體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞,觀察高壓氧(Hyperbaric oxygen,HBO)治療對正常和缺氧狀態(tài)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(Retinal pigment epithelium,RPE)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及色素上皮衍生因子(PEDF)表達(dá)的影響。
方法:
體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞ARPE-19,隨機(jī)分成對照組(正常對照組用DMEM/F12培養(yǎng)液,缺氧對照組用含濃度為200μmo
2、l/L CoC12的DMEM/F12培養(yǎng)液)和實(shí)驗(yàn)組(0.15MPa高壓氧處理組,0.2MPa高壓氧處理組,0.25MPa高壓氧處理組,缺氧+0.15MPa高壓氧處理組,缺氧+0.2MPa高壓氧處理組,缺氧+0.25MPa高壓氧處理組)。各實(shí)驗(yàn)組100%純氧下暴露60和90min,每隔24h暴露一次,共暴露2次.以蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測細(xì)胞中的PEDF及TNF-α表達(dá)情況。
結(jié)果:
Weste
3、rn Blot法顯示:①缺氧組與正常組在HBO干預(yù)后(0.15MPa組、0.20MPa組、0.25MPa組在所有觀察時(shí)間(60min、90min)),細(xì)胞內(nèi)PEDF表達(dá)量增加(P<0.01),正常組的表達(dá)量與缺氧組相比明顯較高,各組PEDF表達(dá)量與HBO干預(yù)時(shí)間無統(tǒng)計(jì)意義;②正常組與缺氧組在HBO干預(yù)后(0.15MPa組、0.20MPa組、0.25MPa組在所有觀察時(shí)間(60min、90min)),細(xì)胞內(nèi)TNF-α表達(dá)量均減少(P<0.
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