楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪細胞分化與防治肥胖機理的實驗研究.pdf

1、目的：通過體外實驗(細胞培養(yǎng))研究楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪細胞分化的作用及分子調(diào)控機制。通過體內(nèi)實驗(動物實驗)研究楂曲平胃散預防小鼠肥胖和治療肥胖小鼠的作用，并探討其作用機制是否與其抑制前脂肪細胞分化的作用有關(guān)。 方法：(1)體外實驗：加入楂曲平胃散處理原代培養(yǎng)小鼠前脂肪細胞，運用形態(tài)學方法觀察細胞分化過程中的形態(tài)變化、運用油紅0染色提取法檢測細胞內(nèi)的脂肪含量、運用酶組織化學提取法檢測細胞內(nèi)甘油磷酸脫氫酶(GPDH)的含量，同

2、時運用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)檢測細胞分化相關(guān)基因C/EBPα、PPARγ、ADD1/SREBP1、Pref-1mRNA的表達。(2)體內(nèi)實驗：進行楂曲平胃散防治肥胖作用的研究，在實驗過程中運用稱量方法測定食量、體重和體脂重量，根據(jù)公式計算小鼠肥胖指數(shù)和脂肪系數(shù)；運用形態(tài)學方法觀察脂肪細胞大小及肝、腎形態(tài)變化；運用生化方法測定血脂含量。 結(jié)果：(1)體外實驗：楂曲平胃散作用于細胞后，從形態(tài)學角度細胞內(nèi)脂肪顆粒出現(xiàn)的

3、速度較慢且數(shù)量較少；細胞內(nèi)脂肪含量和細胞分化標志酶—GPDH的含量均少于陰性對照組細胞：同時C/EBPα mRNA、PPARγ mRNA、ADD1/SREBP1mRNA的表達量減少，Pref-1 mRNA的表達量增多。4mg/ml和6mg/ml劑量組效果明顯。(2)體內(nèi)實驗：楂曲平胃散用藥后，小鼠食量有一定減少，體重減輕、肥胖指數(shù)下降，體脂重量減輕、脂肪系數(shù)下降，血脂含量降低，脂肪細胞體積變小。高、中劑量組效果明顯。同時，各組小鼠肝、腎