CdSe-CdS量子點(diǎn)-酶生物共軛體的制備及其在有機(jī)磷農(nóng)藥分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、本文利用量子點(diǎn)獨(dú)特的光學(xué)性質(zhì)，通過表面修飾與有機(jī)磷水解酶蛋白結(jié)合，形成水解酶-量子點(diǎn)生物共軛體，以此作為生物傳感器快速、專一性檢測(cè)農(nóng)藥甲基對(duì)硫磷。 本論文主要包括三個(gè)方面內(nèi)容： 1.闡述課題的研究意義，介紹了量子點(diǎn)的發(fā)展、性質(zhì)、特點(diǎn)以及量子點(diǎn)在生物、醫(yī)學(xué)和分析化學(xué)中的應(yīng)用。 2.通過水相和有機(jī)相兩種方法合成了水溶性的核殼式CdSe/CdS量子點(diǎn)，在合成方法、光學(xué)性質(zhì)以及穩(wěn)定性等方面比較了兩種方法的優(yōu)缺點(diǎn)，結(jié)果表明

2、有機(jī)相合成量子點(diǎn)不僅具有良好的光學(xué)性質(zhì)，而且轉(zhuǎn)移到水相后穩(wěn)定性良好。 通過紫外可見光譜、熒光激發(fā)和發(fā)射光譜研究了量子點(diǎn)的光學(xué)性質(zhì)；利用透射電子顯微鏡(TEM)對(duì)量子點(diǎn)的晶體大小進(jìn)行了表征。同時(shí)討論了合成的量子點(diǎn)在不同pH溶液中的光學(xué)性質(zhì)變化，進(jìn)一步分析了不同極性溶劑對(duì)量子點(diǎn)熒光性質(zhì)的影響。結(jié)果表明：在中性條件下CdSe/CdS量子點(diǎn)的光學(xué)性質(zhì)較在合成條件下沒有明顯變化，熒光強(qiáng)度沒有明顯變化，這為量子點(diǎn)與水解酶的結(jié)合提供了非常有利

3、的條件。 3.通過硫酸銨沉淀、陰離子交換層析等一系列步驟從有機(jī)磷農(nóng)藥降解菌(Pseudomonas sp．DLL-1)中獲得了甲基對(duì)硫磷水解酶(MPH)，并通過自組裝的方式，與巰基乙酸包裹的量子點(diǎn)形成MPH/QDs生物共軛體。在甲基對(duì)硫磷的作用下，MPH結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，致使量子點(diǎn)熒光猝滅，量子點(diǎn)熒光猝滅程度與甲基對(duì)硫磷濃度(2.1×10-8～3.0×10-6mol/L)滿足米氏方程Y=1.5816X/(1.8697×10-6+X，

4、在較低濃度時(shí)(2.1×10-8～1.05×10-6mol/L)量子點(diǎn)熒光猝滅程度Q與甲基對(duì)硫磷濃度C呈線性關(guān)系Q=0.64842C-0.02292，相關(guān)系數(shù)R=0.9991。按實(shí)驗(yàn)方法對(duì)0.5 μmol/L甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液平行測(cè)定11次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=0.39％。檢出限為2.1×10-8mol/L。此法只需檢測(cè)熒光強(qiáng)度，簡單、快速、靈敏度高。實(shí)驗(yàn)測(cè)試了土壤、田間的雜草、蔬菜等樣品中的甲基對(duì)硫磷含量，并與傳統(tǒng)方法(HPLC)進(jìn)行比