TLR4在宮頸癌中的表達(dá)及相關(guān)功能研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文TLR4在宮頸癌中的表達(dá)及相關(guān)功能研究姓名：王永軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：王世宣201105華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文3第一部分第一部分TLR4在正常宮頸、宮頸病變組織以及不同在正常宮頸、宮頸病變組織以及不同HPV亞型宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)亞型宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)目的目的從組織、細(xì)胞、蛋白質(zhì)以及mRNA轉(zhuǎn)錄水平，探討TLR4在正常宮頸組織、宮頸不典型增生、宮頸癌組織以及不同H

2、PV亞型宮頸癌細(xì)胞株中表達(dá)特點(diǎn)并探討高危型HPV對(duì)TLR4表達(dá)的影響。方法方法1、免疫組織化(IHC)對(duì)12例因子宮良性病變行全子宮切除的正常宮頸組織、30例宮頸輕度不典型增生、30例宮頸中重度不典型增生以及49例宮頸癌患者病理石蠟標(biāo)本進(jìn)行切片觀察，了解TLR4在上述組織中的表達(dá)特點(diǎn)。2、細(xì)胞免疫熒光法對(duì)HPV18（）Hela、HPV16（）Siha以及HPV()C33a宮頸癌細(xì)胞株進(jìn)行TLR4抗體熒光標(biāo)記，用免疫熒光顯微鏡、激光顯微共

3、聚焦顯微鏡觀察TLR4在不同HPV亞型宮頸癌細(xì)胞株中表達(dá)特點(diǎn)。3、蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)（WB）TLR4在不同HPV亞型宮頸癌細(xì)胞株中表達(dá)變化。4、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RTPCR）檢測(cè)TLR4在不同HPV亞型宮頸癌細(xì)胞株中表達(dá)變化。結(jié)果結(jié)果1、免疫組化結(jié)果顯示，TLR4隨著宮頸不典型增生病變程度的增高以及宮頸癌的分期增加，其表達(dá)逐漸增強(qiáng)，正常宮頸組織CINICINII、IIIICC，陽(yáng)性表達(dá)率分別為8.33%、20.00%、26.67%和55

4、.10%，TLR4在各級(jí)別病變中的表達(dá)有顯著性差異(P0.01)。TLR4在正常宮頸的粘膜層有表達(dá)，在正常宮頸間質(zhì)無(wú)表達(dá)。在宮頸癌I、II、III和IV期癌組織中，TLR4的表達(dá)呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)，分別為I期50.00%、II期57.14%、III和IV期為62.50%，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。TLR4的表達(dá)與患者年齡以及細(xì)胞分化程度無(wú)明顯的相關(guān)性。2、細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)結(jié)果顯示，熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡發(fā)現(xiàn)TLR4表達(dá)在HPV陽(yáng)性