黃酮類化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響及MDA-MB-453-BCRP耐藥株的構(gòu)建.pdf

1、黃酮類化合物(flavonoids)是具有C6-C3-C6結(jié)構(gòu)的多酚類化合物,在植物中分布廣泛,文獻(xiàn)報(bào)道其有抗腫瘤活性,抗腫瘤機(jī)制包括抑制腫瘤細(xì)胞增殖,調(diào)節(jié)細(xì)胞信號(hào)通路,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,促進(jìn)抑癌基因表達(dá),抑制癌基因表達(dá),抑制耐藥蛋白的作用等。
　　 乳腺癌是女性?；嫉膼盒阅[瘤之一,許多患者在完全治愈后仍然會(huì)復(fù)發(fā)且伴隨有病灶轉(zhuǎn)移和耐藥性的產(chǎn)生。ABC家族的藥物外泵蛋白是一類通過主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)將細(xì)胞內(nèi)藥物泵出,從而限制細(xì)胞內(nèi)藥物濃度的蛋

2、白質(zhì),被認(rèn)為與耐藥性的發(fā)生有關(guān)。BCRP,又名ABCG2,屬于ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子家族,在mitoxantrone,doxorubicin和daunorubicin耐藥性的腫瘤細(xì)胞中都發(fā)現(xiàn)BCRP過表達(dá)。
　　 本文通過MTT法分析比較了12種黃酮類化合物(包括黃酮苷元和黃酮苷)對(duì)乳腺癌細(xì)胞(MCF-7L,MDA-MB-231)、肝癌細(xì)胞(SMCC-7721)、結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT-15)增殖抑制情況;光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化。木犀草素

3、處理MDA-MB-23172h的IC50為56.67μM,木犀草素處理SMCC-772172h的IC50為72.92μM。在相同濃度下,通過MTT法比較木犀草素與五氟尿嘧啶對(duì)MDA-MB-231和正常細(xì)胞HBL-100,SMCC-7721和正常細(xì)胞L-02的抑制生長(zhǎng)活性,結(jié)果表明木犀草素對(duì)腫瘤細(xì)胞(MDA-MB-231和SMCC-7721)的增殖抑制作用雖然沒有五氟尿嘧啶強(qiáng),但對(duì)正常細(xì)胞(HBL-100和L-02)毒副作用比五氟尿嘧啶小

4、。根據(jù)12種化合物對(duì)癌癥細(xì)胞增殖抑制作用的強(qiáng)弱,比較其構(gòu)效關(guān)系發(fā)現(xiàn)B環(huán)6位羥基化顯著提高黃酮苷元化合物對(duì)癌癥細(xì)胞的增殖抑制活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為改造黃酮化合物的結(jié)構(gòu),從而增強(qiáng)其抑制癌癥細(xì)胞增殖作用提供依據(jù)。
　　 本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了pcDNA3.1+/bcrp重組載體,用脂質(zhì)體成功轉(zhuǎn)染乳腺癌MDA-MB-453細(xì)胞,通過G418篩選抗性株并通過RT-PCR鑒定篩選出MDA-MB-453/BCRP耐藥株,為下一步篩選逆轉(zhuǎn)BCRP耐藥性的化合物