補瀉同施、調(diào)節(jié)平衡法對2型糖尿病胰島細胞修復(fù)的臨床觀察及實驗研究.pdf

1、根據(jù)“補瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”的治療方法，將具有“益氣養(yǎng)陰，補腎健脾，潤肺清胃，化瘀通絡(luò)”功效的經(jīng)驗方黃地吉仙湯應(yīng)用于臨床2型糖尿病的治療，驗證由導師寧亞功教授提出的“補瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”療法對2型糖尿病的治療效應(yīng)，為臨床治療糖尿病提供新的思路和方法。此外對2型糖尿病大鼠進行實驗研究，為進一步探索“補瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”療法的作用機制提供實驗依據(jù)。本研究分為兩個部分：
　　 第一部分：補瀉同施、調(diào)節(jié)平衡法對2型糖尿病胰島細胞修復(fù)的臨床

2、觀察。
　　 目的：探討“補瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”療法對2型糖尿病β細胞修復(fù)的作用，為臨床治療2型糖尿病尋找有效方法。
　　 方法：將符合入選標準的2型糖尿病患者60例，采用簡單隨機的方法將受試者分為2組，對照組和治療組各30例。在相同的飲食和運動指導的基礎(chǔ)上，對照組予口服二甲雙胍片治療，治療組給予黃地吉仙湯治療。2組均觀察12周。測定兩組治療前后的空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)、空腹C肽、體重、體重指數(shù)、穩(wěn)態(tài)模

3、型胰島素抵抗指數(shù)、穩(wěn)態(tài)模型β細胞功能指數(shù)、肝腎功能安全性指標。并收集對應(yīng)時間段的臨床癥狀進行積分。采用SPSS18.0對結(jié)果進行統(tǒng)計分析，進行前后對照及組間對照，分析研究生化指標的變化情況和意義以及臨床癥狀的改善情況。
　　 結(jié)果：⑴治療前兩組一般情況對比，兩組患者性別、年齡、病程、體重、體重指數(shù)、FPG、血壓均沒有統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，可知兩組資料具有可比性。⑵治療后，兩組患者的體重、體重指數(shù)都有明顯的降低(P＜0.01

4、)，兩組相比，不具有統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。⑶治療后，兩組患者空腹血糖有顯著降低(P＜0.01)，兩組之間相比沒有顯著差異(P＞0.05)。⑷治療后，與治療前相比，兩組均能顯著降低空腹胰島素水平(P＜0.01)，并能顯著升高空腹C-肽水平(P＜0.01)。兩組間比較無顯著差異(P＞0.05)。⑸治療后，兩組HOMA-IR、ISI與治療前相比均有顯著降低，有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。治療后兩組間比較，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。治

5、療后，兩組HOMA-β與治療前相比均明顯升高，有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，治療后兩組間比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。⑹治療后，兩組中ALT、AST、r-GT等肝功能指標較前均有降低(P＜0.05)，兩組間比較只有r-GT有差異(P＜0.05)，ALT、AST兩組間無明顯差異(P＞0.05)。治療后，兩組中BUN、CR均無明顯變化(P＞0.05)，兩組間比較無明顯差異(P＞0.05)。⑺)治療后，兩組癥狀積分均明顯減少，與治療前

6、相比均有顯著統(tǒng)計學差異（兩組組內(nèi)比較均出現(xiàn)P＜0.01）。兩組間比較，治療組優(yōu)于對照組，有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。⑻治療后，兩組臨床療效比較，治療組有效率比對照組有效率高，組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：黃地吉仙湯能顯著改善中醫(yī)臨床癥狀和改善2型糖尿病胰島β細胞功能，提示其機制可能與降低血糖、改善胰島素抵抗、減少胰島細胞凋亡、修復(fù)胰島細胞等有關(guān)?！把a瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”療法指導下組方的黃地吉仙湯有與二甲

7、雙胍相接近的降低血糖等方面的作用，且其臨床癥候療效優(yōu)于對照組。
　　 第二部分：補瀉同施、調(diào)節(jié)平衡法對2型糖尿病胰島細胞修復(fù)的實驗研究。
　　 目的：研究在“補瀉同施、調(diào)節(jié)平衡”治療方法指導下組方的黃地吉仙湯對糖尿病大鼠胰島細胞修復(fù)的影響，探討黃地吉仙湯對減少胰島細胞凋亡的作用靶點與作用機理，從而，揭示黃地吉仙湯的作用機制。證實黃地吉仙湯在實驗室及臨床上具有改善患者胰島細胞凋亡及修復(fù)胰島細胞的作用。
　　 方法：

8、SPF級雄性SD大鼠60只。設(shè)置正常組10只，余50只利用高糖高脂飼料+一次性小劑量腹腔注射STZ+精神緊張法誘發(fā)2型糖尿病大鼠模型。造模成功后隨機分為模型組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組、二甲雙胍組各10只。各組給藥8周后測定體重，檢測FPG等指標;并取胰腺組織行HE染色和免疫組化染色觀察。
　　 結(jié)果：⑴大鼠一般情況:正常組大鼠的一般情況最好，毛發(fā)光澤，活動自如，精神狀態(tài)佳，飲食、飲水及大小便正常，無死亡;模型組

9、大鼠的一般情況最差，毛發(fā)雜亂無光，精神狀態(tài)萎靡，行動遲緩，并出現(xiàn)多飲多尿現(xiàn)象。其他各藥物組在造模成功后一段時間內(nèi)出現(xiàn)模型組上述情況，經(jīng)給藥治療后均有不同程度改善。⑵體重:實驗結(jié)束時，六組大鼠體重之間有顯著差異，具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。進一步多重比較，正常組與其他五組比較均有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，其他各組之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。⑶血清學指標:實驗結(jié)束時，六組間大鼠血糖無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。⑷HE染色

10、顯示各組大鼠胰島形態(tài):正常組大鼠胰島豐富，團索狀，呈類圓形，胞漿豐富，形態(tài)完整，胞核居中，細胞邊界清晰。與正常組相比，模型組大鼠胰島數(shù)目明顯減少，細胞體積較大，形態(tài)不一，分布零散，邊緣不齊，細胞之間邊界不清，且細胞核呈偏心分布。與模型組相比，中藥高劑量組與二甲雙胍組胰島形態(tài)明顯改善。中藥中劑量組與中藥低劑量組改善不明顯。⑸胰島素免疫組化染色結(jié)果:陽性信號表現(xiàn)為細胞被染色成棕色顆粒。與正常組相比，模型組陽性細胞明顯減少，各治療組較模型組有

11、不同程度改善。⑹六組大鼠胰腺組織中ki67的表達指數(shù)均小于1％，相比較而言，正常組、二甲雙胍組及中藥高劑量組的ki67的表達相對較多。
　　 結(jié)論：本實驗成功誘導了2型糖尿病大鼠的模型，造模一次成功率為90％。HE染色及胰島素免疫組化染色顯示經(jīng)中西藥干預(yù)后，中藥高劑量組、二甲雙胍組的糖尿病大鼠胰島細胞得到一定的改善，尤其是胰島細胞分泌胰島素的功能得到一定程度的修復(fù)。ki67免疫組化染色結(jié)果顯示糖尿病并非腫瘤病變，細胞增殖的程度和