抗血栓和促內(nèi)皮化雙重功能生物活性涂層的制備與研究.pdf

1、冠心病被認(rèn)為是威脅人類生命健康的重大疾病之一，冠心病的臨床治療一般采用藥物治療、外科手術(shù)治療和介入治療。但是，目前在接受介入治療的患者中，約有95％以上的病例需要重新植入支架，而且，20～30%支架內(nèi)再狹窄率仍是支架植入術(shù)后最常見(jiàn)的問(wèn)題。藥物洗脫性支架(Drug Eluting Stent，DES)被認(rèn)為是冠狀動(dòng)脈介入治療的里程碑。自從第一代紫杉醇藥物洗脫性支架和雷帕霉素支架應(yīng)用到臨床以來(lái)，支架內(nèi)再狹窄率一度降低到10%。然而，近來(lái)一些

2、報(bào)道稱，藥物洗脫性支架雖然降低了再狹窄率的發(fā)生，但是支架表面攜帶的聚合物會(huì)引起一些副作用，諸如慢性動(dòng)脈壁炎癥、內(nèi)皮功能障礙和延遲愈合等問(wèn)題。所有這些因素會(huì)促使藥物洗脫性支架植入后引起后期血栓的發(fā)生。盡管這些問(wèn)題在臨床上沒(méi)有足夠的病例出現(xiàn)，但后期血栓被認(rèn)為是藥物洗脫性支架所帶來(lái)的最嚴(yán)重的問(wèn)題。所以，在新一代藥物洗脫性支架的研發(fā)與制備過(guò)程中，如何加速支架表面內(nèi)皮化和減少支架表面血栓的形成成為首要問(wèn)題。
　　 肝素作為抗凝劑已經(jīng)被廣泛

3、地應(yīng)用于臨床，它在抑制支架內(nèi)亞急性血栓的形成過(guò)程中具有無(wú)可爭(zhēng)論的作用；細(xì)胞外基質(zhì)纖維連接蛋白(Fibronectin)中的RGD能夠促進(jìn)細(xì)胞粘附、擴(kuò)展和分化；血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelialgrowth factor，VEGF)能夠介導(dǎo)細(xì)胞增殖與分化以及誘導(dǎo)心血管的形成。本研究的目的在于通過(guò)層層自組裝的原理在鈦合金表面構(gòu)建肝素、內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和纖維連接蛋白生物活性涂層，利用肝素能有效抑制血小板聚集從而達(dá)到

4、抗血栓的作用，利用纖維連接蛋白能夠促進(jìn)細(xì)胞粘附、鋪展以及血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子能夠促進(jìn)細(xì)胞增殖的原理來(lái)促進(jìn)支架材料實(shí)現(xiàn)快速內(nèi)皮化，從而達(dá)到抗血栓和促進(jìn)內(nèi)皮化的雙重功效。本論文的主要內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　 ①靜態(tài)水接觸角測(cè)試證明，隨著組裝物質(zhì)的不斷沉積，鈦合金表面的親疏水性發(fā)生變化，材料表面親疏水性的變化與材料表面最外層物質(zhì)有關(guān)；表面等離子體(SPR)結(jié)果顯示隨著組裝層數(shù)的增加，SPR角呈現(xiàn)線性增加；原子力顯微鏡(AFM)結(jié)果證實(shí)，

5、經(jīng)過(guò)組裝后的鈦合金表面形貌發(fā)生明顯變化。
　　 ②體外血液相容性實(shí)驗(yàn)證實(shí)，通過(guò)自組裝方法改性后的鈦合金和沒(méi)有處理過(guò)的鈦合金溶血率都低于國(guó)家安全性規(guī)定的5%；組裝(Hep/VEGF)5和(Hep/VEGF)5-Fn的鈦合金能夠有效抑制血小板的聚集和活化；自組裝改性能夠有效延長(zhǎng)凝酶原時(shí)間(PT)和活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)，具有較好的血液相容性。
　　 ③細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)說(shuō)明，在組裝的過(guò)程中，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和纖維連接蛋

6、白的活性沒(méi)有被破壞，組裝(Hep/VEGF)5和(Hep/VEGF)5-Fn的鈦合金能夠有效促進(jìn)細(xì)胞的增殖；改性后鈦合金對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的促進(jìn)作用是復(fù)合涂層共同作用的結(jié)果；細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)證實(shí)，改性后的鈦合金允許內(nèi)皮細(xì)胞的粘附，且粘附在(Hep/VEGF)5-Fn改性后的鈦合金表面的細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量明顯優(yōu)于沒(méi)有改性的鈦合金材料。經(jīng)過(guò)(Hep/VEGF)5-Fn改性后的鈦合金不僅NO的分泌量得到明顯的增加，而且總抗氧化能力T-AOC也得到了顯著提高，