納豆菌發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶及與紅曲菌共培養(yǎng)的初探.pdf

1、從不同產(chǎn)地的納豆樣品中分離得到10株納豆菌,對所得納豆菌的菌落形態(tài)特征及菌體特征進(jìn)行觀察。其中納豆菌BN-7產(chǎn)納豆激酶活力相對最高,測定其生理生化特征后,初步鑒定為枯草芽孢桿菌。研究BN-7種子的生長曲線,確定接入發(fā)酵培養(yǎng)基的種齡為18h。
　　 由單因子實驗可知:納豆菌BN-7液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶的相對最佳碳源為木糖,相對最佳氮源為大豆蛋白胨,培養(yǎng)溫度為30℃,發(fā)酵周期為3d。Plackett-Burman法優(yōu)化實驗表明:木糖濃

2、度、大豆蛋白胨濃度以及Na2HPO4濃度對納豆激酶的酶活力有顯著影響作用。響應(yīng)面法優(yōu)化后的工藝條件為:木糖2.02％、大豆蛋白胨3.06％、Na2HPO40.67％、NaH2PO40.1％、MgSO40.05％、CaCl20.02％,初始pH值為7.0,轉(zhuǎn)速150 r/min,30℃培養(yǎng)72h。按照此條件發(fā)酵,納豆激酶活力可達(dá)1025IU/ml,比優(yōu)化前提高了約40％。
　　 納豆菌BN-7相對最佳固態(tài)發(fā)酵工藝:黃豆含水率50％

3、,物料厚度2cm,添加1％葡萄糖和0.05％FeSO4,接種量為8％,發(fā)酵12h后補加0.05％聚乙二醇,35℃培養(yǎng)24h。此條件下納豆菌BN-7固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶活力可達(dá)1426IU/g。
　　 對納豆菌BN-7和紅曲菌GM011共培養(yǎng)進(jìn)行了初步探索。結(jié)果表明紅曲菌GM011不能在納豆菌發(fā)酵培養(yǎng)基中正常生長；在紅曲菌發(fā)酵培養(yǎng)基中混合培養(yǎng),紅曲菌GM011菌絲體生長不會受到很大影響,但是納豆菌BN-7不能正常生長。在紅曲菌發(fā)酵培