連翹葉化學(xué)成分及藥理活性研究.pdf

1、連翹(Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl)屬于木犀科(Oleaceae)連翹屬(Forsythia)的開花落葉灌木，廣泛分布在我國山東、河南、河北、山西、陜西、甘肅、湖北、四川等省份。其果實(shí)具有清熱解毒、消腫散結(jié)的功效，常被用來治療癰疽、瘰疬、乳癰、丹毒、風(fēng)熱感冒、溫病初起、溫?zé)崛霠I、神昏發(fā)斑、高熱煩渴、熱淋尿閉等癥?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，連翹中含有三萜，苯乙醇苷，木脂素及黃酮等多種類型化合物，且這些化合物具有抗菌、抗炎

2、、抗癌、抗病毒、抗氧化等藥理活性。近年研究發(fā)現(xiàn)有些活性成分，如連翹苷、連翹酯苷等在連翹葉中的含量比在連翹果實(shí)中的含量還要高，而連翹葉在河北武安及山西平定的長壽村被制成保健茶為當(dāng)?shù)鼐用耧嬘靡延袔装倌甑臍v史。搞清楚連翹葉中的化學(xué)成分及其生理活性，不僅可以為其在某些藥用方面替代果實(shí)是否合理提供一定的科學(xué)依據(jù)，也可以對(duì)連翹葉資源進(jìn)行開發(fā)和利用，將其變廢為寶。
　　目的：以連翹葉作為研究對(duì)象，利用多種色譜分離手段對(duì)其中的化合物進(jìn)行系統(tǒng)提取分

3、離。對(duì)得到的單體化合物，采用UV、1D及2DNMR、MS等波譜技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，豐富連翹和連翹屬植物的化合物庫，同時(shí)通過活性篩選尋找連翹葉中新的活性成分，為連翹葉的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供一定的科學(xué)依據(jù)。
　　方法：干重4.4Kg的連翹葉通過乙醇提取后，分步萃取得到石油醚（60～90℃）、二氯甲烷、乙酸乙酯及正丁醇四部分。其中乙酸乙酯部分和正丁醇部分分別經(jīng)過大孔樹脂色譜、硅膠柱色譜、反相柱色譜、葡聚糖凝膠柱色譜等分離方法反復(fù)分離純化。

4、得到的化合物經(jīng)過UV、1D及2DNMR、MS等波譜學(xué)方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。對(duì)從連翹葉中分離得到的17個(gè)化合物進(jìn)行人腫瘤細(xì)胞增殖抑制活性測試以及抑制蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）活性研究。
　　結(jié)果：通過系統(tǒng)提取分離連翹葉的化學(xué)成分，共分離鑒定26個(gè)化合物，包括12個(gè)三萜類化合物，4個(gè)木脂素類化合物，3個(gè)黃酮類化合物，3個(gè)苯乙醇苷類化合物及4個(gè)其他類化合物：β-Ursolicacid(1),Dammarolicacid(2),Corosol

5、icacid(3),SuspenamideA(4),6''-Acetylforsythin(5),Hovenicacid(6),Forsythin(7),(+)epipinoresinol-4'-β-D-glucoside(8),β-D-glucopyranose,1-[3-(4-hydroxyphenyl)-2-propenoate](9),QuadranosideIV(10),arjunglucosideII(11),Kaempfe

6、rol(12),Quercetin(13),Trans-caffeicacidmethylester(14),(+)-Phillygenin(15),SuspensanosideA(16),Niga-ichigosideF1(17),ArjunglucosideI(18),(19),Protocatechuicacid(20),SuspensanosideC(21),SuspensanosideB(22),ForsythosideA(2

7、3),ForsythosideI(24),glucose(25),rutin(26)。藥理研究表明SuspensanosideA(16)，F(xiàn)orsythin(7),(+)Epipinoresinol-4'-β-D-glucoside(8),Kaempferol(12),(+)-Phillygenin(15)和NigaichigosideF1(17)對(duì)MCF-7和BGC-823癌細(xì)胞表現(xiàn)出顯著的抗增殖活性。SuspenamideA（4）表

8、現(xiàn)出顯著的PTPs抑制活性。
　　結(jié)論：對(duì)連翹葉正丁醇萃取部分和乙酸乙酯萃取部分的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究，共分離鑒定26個(gè)化合物。其中自然界中新發(fā)現(xiàn)的化合物有5個(gè)，包括三個(gè)三萜類化合物SuspensanosideA（16），SuspensanosideB(22)和SuspensanosideC(21)，一個(gè)鄰氨基苯甲酸衍生物suspenamideA(4)和一個(gè)木脂素類化合物6''-Acetylforsythin(5)。化合物(4)

9、是自然界中首次發(fā)現(xiàn)的具有聯(lián)苯-4-磺酰結(jié)構(gòu)的天然產(chǎn)物。Corosolicacid(3),Hovenicacid(6),?-D-Glucopyranose,1-[3-(4-hydroxyphenyl)-2-propenoate](9),ArjunglucosideII(10),QuadranosideIV(11),Kaempferol(12)，Trans-caffeicacidmethylester(14),Niga-ichigoside

10、F1(17)和ArjunglucosideI(18)為連翹屬中首次分離得到。
　　新化合物SuspensanosideA(16)對(duì)MCF-7和BGC-823癌細(xì)胞顯示抗增殖活性，其IC50分別為12.44±0.69μM和15.44±0.99μM。Forsythin(7),(+)Epipinoresinol-4'-β-D-glucoside(8),Kaempferol(12),(+)-Phillygenin(15)和Nigaichi