益氣化痰祛瘀方對冠心病大鼠纖溶系統(tǒng)的影響.pdf

1、目的:益氣化痰祛瘀方(由瓜蔞、薤白、半夏、川芎、赤芍、三七、黃芪、桂枝組成)具有益氣溫陽,化痰祛瘀,通脈止痛的功效,為臨床觀察篩選的效方,對冠心病(CHD)具有較好的治療效果。為了進一步探討其作用機制,參考相關文獻采用喂飼高脂飼料和腹腔注射垂體后葉素的方法復制CHD模型,并施加藥物干預,觀察了其對CHD大鼠心電圖ST段變化以及血脂、內(nèi)皮素、一氧化氮、6-酮-前列腺素F1α、血栓烷B2含量的影響;運用免疫組織化學方法觀察了心肌和主動脈組織

2、PAI-1、t-PA表達的變化;并運用HE染色方法觀察了本方對心肌和主動脈組織形態(tài)學的影響。
　　 方法:
　　 選用SD大鼠60只,體重160～180g,雄性。大鼠自由飲水進食,飼養(yǎng)于18℃～22℃明暗各12小時的清潔級動物實驗室內(nèi),正常喂養(yǎng)一周后,隨機分為5組,每組12只。具體分組情況如下:(1)正常對照組(簡稱正常組);(2)模型對照組(簡稱模型組);(3)益氣化痰祛瘀方低劑量組(簡稱低劑量組);(4)益氣化痰祛瘀

3、方高劑量組(簡稱高劑量組);(5)復方丹參滴丸對照組(簡稱對照組)。參考相關文獻,除正常組外,其余各組每天均給予高脂飼料,連續(xù)6周,于末次灌胃給藥前72、48、24小時,腹腔注射垂體后葉素(30u/kg),連續(xù)3次,每次間隔24小時,復制冠心病心肌缺血模型。大鼠造模的同時,各治療組灌服治療藥或?qū)φ账?正常組和模型組灌服等容積的蒸餾水,各組1次/d灌胃,每次用藥體積均按1ml/100g計算,共給藥6周。實驗6周末,于第3次腹腔注射垂體后葉

4、素24h后,以20％烏拉坦(4ml/kg)腹腔注射麻醉,連接BL-420E+生物機能實驗系統(tǒng),記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖ST段的變化。然后在麻醉狀態(tài)下,股動脈取血,將血樣低溫離心,分離血清或血漿,檢測TC、TG、HDL-C、LDL-C、NO、ET、6-keto-PGF1α、TXB2含量的變化。取血后迅速開胸剖取心臟和胸主動脈,在心尖部取適量的心肌組織,將心肌組織和胸主動脈用預冷的0.9％Nacl注射液沖洗,濾紙吸濕后,放入4％多聚甲醛液中固定,常

5、規(guī)制作組織切片,運用免疫組化法觀察心肌和主動脈組織PAI-1、t-PA表達的變化,運用HE染色法觀察心肌和主動脈組織形態(tài)學變化。
　　 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果:
　　 1益氣化痰祛瘀方對CHD大鼠心電圖ST段的影響
　　 模型組大鼠心電圖ST段的變化值(0.28±0.04)明顯高于正常組(0.14±0.05)(P＜0.01),顯示冠心病大鼠存在著明顯的心肌缺血。經(jīng)藥物

6、干預后,高、低劑量組和對照組大鼠心電圖ST段的變化值(0.19±0.03、0.20±0.04、0.20±0.05)均明顯低于模型組(0.28±0.04)(P＜0.01)。高、低劑量組和對照組之間比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2益氣化痰祛瘀方對CHD大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量的影響
　　 模型組大鼠血清TC、TG、LDL-C的含量(3.30±0.42、1.14±0.11、1.42±0.16)

7、較正常組(1.68±0.21、0.53±0.06、0.86±0.08)明顯升高(P＜0.01),而血清HDL-C含量(0.44±0.10)較正常組(0.73±0.12)明顯降低(P＜0.01),說明冠心病大鼠存在著明顯的脂質(zhì)代謝紊亂。經(jīng)藥物干預后,各用藥組均能降低大鼠血清TC、TG、LDL-C含量(P＜0.01),升高血清HDL-C含量(P＜0.01)。其中,高劑量組(1.77±0.14)和低劑量組(1.80±0.18)在降低血清TC含

8、量方面的作用優(yōu)于對照組(2.39±0.34)(P＜0.01),而高、低劑量組之間比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);高劑量組(0.57±0.08)在降低血清TG含量方面的作用優(yōu)于低劑量組(0.84±0.11)和對照組(0.82±0.10)(P＜0.01),而低劑量組和對照組之間比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);高劑量組(1.05±0.16、0.65±0.13)、低劑量組(1.14±0.11、0.59±0.09)與對照組(1.11±0.16

9、、0.62±0.09)之間在降低血清LDL-C含量和升高HDL-C含量方面的作用比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 3益氣化痰祛瘀方對CHD大鼠血清NO和血漿ET含量的影響
　　 模型組大鼠血清NO含量(29.14±3.70)較正常組(44.02±4.49)明顯降低(P＜0.01),而血漿ET含量(91.06±8.44)較正常組(66.30±4.98)明顯升高(P＜0.01)。經(jīng)藥物干預后,各用藥組大鼠血清NO含量

10、明顯升高(P＜0.01),血漿ET含量明顯降低(P＜0.01)。其中,高劑量組(41.33±5.23、66.11±7.58)、低劑量組(40.59±3.79、68.00±6.62)在升高血清NO含量和降低血漿ET含量方面的作用均優(yōu)于對照組(36.13±4.31、75.03±7.56)(P＜0.05或P＜0.01),而高、低劑量組之間比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 4益氣化痰祛瘀方對CHD大鼠血漿6-Keto-PGF1α

11、和TXB2含量的影響
　　 模型組大鼠血漿6-Keto-PGF1α含量(281.26±36.67)較正常組(411.96±45.81)明顯降低(P＜0.01),TXB2含量(554.47±57.31)較正常組(294.17±48.92)明顯升高(P＜0.01)。經(jīng)藥物干預后,各用藥組大鼠血漿6-Keto-PGF1α含量明顯升高(P＜0.05或P＜0.01),血漿TXB2含量明顯降低(P＜0.01)。其中,高劑量組(398.17±

12、37.61、304.98±36.77)、低劑量組(383.74±48.23、308.73±29.15)在升高血漿6-Keto-PGF1α和降低血漿TXB2含量方面的作用均優(yōu)于對照組(332.44±67.71、350.76±45.34)(P＜0.05或P＜0.01),而高、低劑量組之間比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 5益氣化痰祛瘀方對CHD大鼠心肌和主動脈組織形態(tài)學的影響
　　 心肌組織:正常組大鼠心肌細胞排列整

13、齊,胞漿著色均勻,細胞核呈長橢圓形,位于心肌纖維中央,心肌纖維呈束狀分布,排列有序,無炎性細胞浸潤。模型組大鼠心肌細胞肥大、排列紊亂,胞漿著色不均勻,細胞核腫脹變形,出現(xiàn)炎性細胞浸潤,心肌細胞間隙增寬、結(jié)締組織增多,心肌纖維排列不齊,部分心肌纖維萎縮或變性,局部可見空泡樣改變。各治療組大鼠心肌組織均有不同程度的改善。其中,高劑量組心肌細胞排列較整齊,細胞核改變較小,心肌纖維結(jié)構(gòu)比較完整,僅見部分心肌細胞之間的間隙增寬;對照組和低劑量組有

14、不同程度的心肌細胞間隙增寬、結(jié)締組織增生和心肌纖維萎縮。
　　 主動脈組織:正常組大鼠主動脈內(nèi)皮細胞完整,主動脈壁內(nèi)膜光滑無增生,未見炎性細胞浸潤。模型組大鼠主動脈壁內(nèi)膜粗糙、增厚,有纖維組織增生,主動脈內(nèi)皮細胞腫脹,出現(xiàn)炎性細胞浸潤。各治療組主動脈組織病理損傷均有改善,其中高劑量組僅見主動脈壁內(nèi)膜略顯粗糙;對照組和低劑量組可見主動脈壁內(nèi)膜粗糙、增厚、纖維組織輕度增生。
　　 6益氣化痰祛瘀方對CHD大鼠心肌、主動脈組織

15、PAI-1、t-PA表達的影響
　　 模型組大鼠心肌和主動脈組織PAI-1表達(0.269±0.023、0.251±0.026)較正常組(0.121±0.027、0.126±0.024)增強(P＜0.01),t-PA表達(0.096±0.021、0.150±0.039)較正常組(0.219±0.040、0.283±0.036)減弱(P＜0.01)。經(jīng)藥物干預后,各用藥組大鼠心肌和主動脈組織PAI-1表達減弱(P＜0.01),t-

16、PA表達增強(P＜0.01)。其中,高劑量組(0.125±0.024、0.145±0.020、0.205±0.026、0.261±0.038)、低劑量組(0.133±0.022、0.159±0.028、0.196±0.028、0.255±0.046)在減弱心肌、主動脈組織PAI-1表達和增強心肌、主動脈組織t-PA表達方面的作用均優(yōu)于對照組(0.166±0.023、0.184±0.026、0.167±0.024、0.211±0.023)

17、(P＜0.05或P＜0.01),而高、低劑量組之間比較均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1益氣化痰祛瘀方可糾正冠心病大鼠心電圖ST段異常改變,降低血清TC、TG、LDL-C含量,升高血清HDL-C含量,呈現(xiàn)出良好的改善心肌缺血、調(diào)節(jié)血脂的作用。
　　 2益氣化痰祛瘀方能明顯改善心肌和主動脈組織的病變程度,表現(xiàn)為用藥后大鼠心肌細胞排列整齊,細胞核和心肌纖維結(jié)構(gòu)基本完整,空泡樣改變和主動脈壁內(nèi)膜增

18、生明顯減輕,炎性細胞浸潤基本消失,說明本方對心肌和主動脈組織具有保護作用。
　　 3益氣化痰祛瘀方能使冠心病大鼠血清NO和血漿6-Keto-PGF1α含量升高,血漿ET和TXB2的含量降低,具有調(diào)節(jié)NO、ET和6-Keto-PGF1α、TXB2的分泌和釋放,保護血管內(nèi)皮功能的作用。
　　 4益氣化痰祛瘀方通過抑制心肌和主動脈組織PAI-1表達,增強心肌和主動脈組織t-PA表達,恢復纖溶系統(tǒng)的平衡狀態(tài),阻止動脈粥樣硬化和血