HMGB1抑制劑對人涎腺腺樣囊性癌細胞株侵襲、遷移的影響及機制研究.pdf

1、目的:體外觀察不同濃度高遷移率蛋白 B1抑制劑—正丁酸鈉對涎腺腺樣囊性癌細胞株ACC-2和ACC-M侵襲、遷移的影響并初步探討其作用機制。
　　方法:1.用不同濃度的正丁酸鈉作用ACC-2、ACC-M細胞24小時,MTT法測定細胞的增殖率,探尋藥物作用的最佳濃度,采用普通光學(xué)倒置顯微鏡觀察細胞的形態(tài)變化。
　　2.Transwell小室實驗檢測藥物對ACC-2、ACC-M細胞侵襲、遷移能力的影響。
　　3.通過 Wes

2、tern-blot和實時熒光定量 PCR分別檢測藥物作用后兩種細胞 HMGB1和TLR4 mRNA和蛋白的表達。
　　結(jié)果:1.正丁酸鈉在0.625mM、1.25mM、2.5mM、5mM、10mM濃度時對ACC-2、ACC-M細胞具有顯著的抑制增殖作用,且抑制作用隨濃度升高而增強(P<0.05)。
　　2.Transwell小室實驗證實五個濃度組的正丁酸鈉均可抑制ACC-M細胞體外侵襲和遷移能力,2.5mM、5mM、10mM

3、濃度組的藥物可以抑制ACC-2細胞的遷移能力,與對照組相比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);五個濃度組的藥物對ACC-2細胞侵襲能力的影響與對照組相比無明顯差異(P>0.05)。
　　3.Western-blot和實時熒光定量PCR結(jié)果顯示五個濃度組的正丁酸鈉處理ACC-M細胞后,可下調(diào)細胞HMGB1和TLR4蛋白及 mRNA的表達,且具有濃度依賴性,與對照組相比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);2.5mM、5mM、10m

4、M濃度組的藥物可以下調(diào) ACC-2細胞 HMGB1和TLR4 mRNA及蛋白的表達(P<0.05)。相關(guān)性分析顯示:TLR4蛋白表達的降低與HMGB1的抑制呈正相關(guān)(r=0.810,P<0.05)。
　　結(jié)論:HMGB1的表達對涎腺腺樣囊性癌細胞的體外生物學(xué)行為發(fā)揮著重要作用,抑制其表達可以顯著降低ACC-M細胞的侵襲和遷移能力,抑制劑濃度較高時還能降低ACC-2細胞的遷移能力,TLR4可能作為HMGB1的受體,參與HMGB1對涎