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1、目的:在目前針灸治療中風(fēng)病的基礎(chǔ)上,結(jié)合現(xiàn)代藥理學(xué)研究基礎(chǔ)制備膠原川芎嗪緩釋劑,研究在大椎、雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴位埋藥對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠腦梗死體積的影響以及穴位埋藥對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制劑-1(TIMP-1)的調(diào)節(jié)作用。 方法: 選用健康SD大鼠160只,隨機(jī)分為6組,正常組10只,假手術(shù)組30只(24h組、72h組、120h組各10只),模型組30只(24h組、72h組、120h組各10只),腹腔注射組
2、30只(24h組、72h組、120h組各10只),電針組30只(24h組、72h組、120h組各10只),穴位埋藥組30只(24h組、72h組、120h組各10只)。采用大腦中動(dòng)脈線栓法(MCAO)制備缺血再灌模型,以膠原川芎嗪制備的緩釋劑(藥線)在大椎、雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴位埋藥。每組中分別取4只大鼠直接斷頭取新鮮腦組織作TTC染色處理;另外6只大鼠以10%水合氯醛麻醉,4℃4%多聚甲醛200ml(含0.1%DEPC)心臟灌注,迅速取腦,在視交
3、叉平面前后2mm處將腦冠狀切開,留取中間部分置于4℃4%多聚甲醛固定液中過夜,將固定后的腦組織進(jìn)行石蠟包埋。分別運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)缺血皮質(zhì)區(qū)MMP-9與TIMP-1含量的變化以及穴位埋藥對(duì)上述指標(biāo)的影響,采用HPIAS-1000計(jì)算機(jī)高清晰彩色圖像分析儀對(duì)切片進(jìn)行圖像分析,結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果: 1.大腦中動(dòng)脈缺血再灌注可明顯損害大鼠的正常行為活動(dòng)。腹腔注射、電針、穴位埋藥組大鼠神經(jīng)體征均有明顯改善,與模型組比較有
4、顯著性差異(P<0.05,P<0.01),其中穴位埋藥能明顯改善大鼠神經(jīng)體征(與腹腔注射組比較,P<0.01;與電針組比較,P<0.05)。 2.腦缺血再灌后經(jīng)TTC染色可見缺血區(qū)有明顯的梗死灶,腹腔注射、電針、穴位埋藥均能減輕缺血再灌后腦梗死體積,與模型組比較有顯著性差異(P<0.01),其中穴位埋藥能明顯縮小腦梗死體積(與腹腔注射組比較,P<0.01;與電針組比較,P<0.05)。 3.免疫組化結(jié)果顯示腦缺血再灌后缺
5、血區(qū)腦組織中MMP-9表達(dá)增高、TIMP-1表達(dá)降低,腹腔注射、電針均能下調(diào)MMP-9表達(dá)、上調(diào)TIMP-1的表達(dá),與模型組比較有顯著性差異(P<0.05),其中穴位埋藥24h對(duì)MMP-9、TIMP-1的調(diào)節(jié)作用并不明顯(與模型組比較,P>0.05;與腹腔注射組比較,P>0.05),其優(yōu)勢(shì)作用表現(xiàn)在72h和120h(與腹腔注射組、電針組比較,P<0.05)。 結(jié)論:大鼠局灶性腦缺血再灌損傷后缺血區(qū)腦組織中MMP-9表達(dá)增高、TI
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