紅霉素預(yù)適應(yīng)對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文紅霉素預(yù)適應(yīng)對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及其機(jī)制的初步研究姓名：陸威成申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)外科指導(dǎo)教師：郭宗澤20090301三、大鼠大腦中動(dòng)脈缺血／再灌注模型(MCAO)的建立大鼠腹腔注射10％水合氯醛(350mg／kg)麻醉，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈(commoncarotidartery，CCA)、頸內(nèi)動(dòng)脈(internalcarotidartery，ICA)、及頸外動(dòng)脈(externalcarotidar

2、tery，ECA)，結(jié)扎ECA遠(yuǎn)端，在CCA遠(yuǎn)端近分叉處剪口，插入直徑026mm的尼龍線使其由ICA入顱至大腦中動(dòng)脈近端，阻斷大腦中動(dòng)脈的血流。在缺血2小時(shí)后將尼龍線拔出形成再灌注，持續(xù)觀察24小時(shí)。四、腦梗死體積的測(cè)定腦缺血再灌注24小時(shí)后，大鼠迅速斷頭取腦，取出的腦組織置于20“C冰箱快速冷凍后，從額極開始每隔2mm冠狀切取腦組織5片，置于2％TTc中，37℃水浴避光孵育30分鐘，計(jì)算腦梗死體積的百分比。參考Shrimakura的方

3、法減少水腫對(duì)梗死體積的影響即梗死體積(％)=【Lv(RVMV)]／RVx100％，其中MV是總的梗死體積，LV，RV分別是左右半球的體積。五、腦組織含水量的測(cè)定EM一3組和對(duì)照組于再灌注24小時(shí)后取腦，將其精確秤重即為濕重(wwt)，在80℃烤箱內(nèi)烤48小時(shí)后取出稱干重(dw)按公式計(jì)算腦組織百分含水量，即腦組織含水量(％)=(wwtdw)／wwtX100％。六、神經(jīng)功能評(píng)分大鼠腦缺血再灌注以后，每天在同一時(shí)間點(diǎn)(下午17點(diǎn))，由同一個(gè)

4、不清楚大鼠分組情況的觀察者對(duì)大鼠的神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)分，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參考改良ZeaLonga法【4】，即：0分：不能自發(fā)行走；1分：自由走動(dòng)狀態(tài)下向病變對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)；2分：抓住鼠尾，大鼠向病變對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)；3分：對(duì)于施向病變對(duì)側(cè)的側(cè)壓力抵抗力下降者；4分：不能伸直病變對(duì)側(cè)前爪，甚至全身向?qū)?cè)屈曲；5分：無(wú)神經(jīng)功能缺損。七、RTPCR法檢測(cè)腦組織中nNoS和HIF1a的mRNA含量的變化大鼠再灌注24小時(shí)后迅速斷頭，取缺血周圍腦組織，用Trizol提取總