異種凍干骨及其與PRF復合物對骨缺損修復與骨整合作用的實驗研究.pdf

1、目的:通過對兔雙側(cè)下頜無牙區(qū)牙槽骨行骨極限缺損造模后分別植入富血小板纖維蛋白(Platelet-rich fibrin，PRF)異種凍干骨復合物及異種凍干骨，并同期植入鈦螺紋釘，觀察并檢測缺損區(qū)新骨形成及釘周骨整合情況，探討PRF和異種凍干骨在骨修復及骨整合中的作用機制，為臨床應用提供實驗參考。
　　方法:
　　1.分組:健康成年新西蘭大白兔12只，雌雄不限，隨機分為3組，每組4只，分別于術后4、8、12周處死。所有實驗動物

2、采取自身對照方法，右側(cè)下頜骨極限缺損區(qū)為實驗組，植入PRF/異種凍干骨復合物;左側(cè)下頜骨極限缺損區(qū)為對照組，植入異種凍干骨。
　　2.異種凍干骨獲取及制備:取自人骨組織，經(jīng)骨髓清洗、深凍、凍干和射線輻照等過程制備。
　　3.PRF的制備:于兔耳中央動脈處快速抽取5ml血置于未添加抗凝劑的采血管中，迅速置于已配平的離心機中，以3000r/min的速度離心10min，停止后取出離心管靜置，可見管內(nèi)血液分為3層:最上層為貧血小板血

3、漿層，中間層為纖維蛋白凝膠層，最底層為紅細胞碎片層。棄上清液，分離中間的纖維蛋白凝膠，即為PRF。5ml兔動脈血可制備約7.5×4.0×0.4mm的PRF。
　　4.造模及干預:在每只實驗動物的雙側(cè)下頜骨門齒遠中無牙區(qū)牙槽骨各造一約5×4×3mm的缺損，缺損后緣位于頦孔前約4mm處，其下緣與頦孔平齊。分別自缺損區(qū)近、遠中壁遠離缺損區(qū)方向以鈦螺紋釘配套鉆針制備一約直徑1.5mm，深3.5mm的種植窩，將鈦螺紋釘擰入種植窩，右側(cè)為實驗

4、組，缺損區(qū)充填PRF/異種凍干骨復合物;左側(cè)為對照組，缺損區(qū)僅植入異種凍干骨，逐層縫合，術后正常飲食。
　　5.觀察結(jié)果:分別于術后4、8、12周以空氣栓塞法處死實驗動物，沿兔口角做切口，分離出下頜骨，去凈其上附麗組織，大體肉眼觀察骨極限缺損區(qū)愈合修復情況;扭矩實驗測試鈦螺紋釘-骨界面的結(jié)合強度，收集數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析;組織學觀察，各標本切片行HE染色后，采集圖像，通過多功能真彩色細胞圖像分析管理系統(tǒng)分析計算新骨形成面積占視野區(qū)面

5、積的百分比，進行新生骨定量分析。
　　結(jié)果:
　　1.標本大體肉眼觀察結(jié)果:實驗組及對照組中所植入的鈦螺紋釘均無松動脫落，所造骨組織缺損區(qū)均逐漸被骨組織覆蓋，表面有不同程度凹陷，實驗組顯示表面形態(tài)恢復更為理想。
　　2.術后4、8、12周同一時間點扭矩測試實驗組種植體-骨結(jié)合強度高于對照組，結(jié)果有顯著性差異，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3.組織學觀察術后4、8、12周同一時間點實驗組新生骨面積與對照組比較