nNOS與NIDD、CAPON在缺血損傷面神經(jīng)核團(tuán)中的表達(dá)意義.pdf

1、目的：檢測(cè)nNOS與其受體蛋白NIDD、CAPON在大鼠顳骨內(nèi)段面神經(jīng)缺血損傷模型中的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化，探討其在面神經(jīng)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷中的表達(dá)意義。
　　方法：1.建立大鼠顳骨內(nèi)段面神經(jīng)巖動(dòng)脈缺血損傷模型:采用SD雄性大鼠建立面神經(jīng)顳骨內(nèi)段面神經(jīng)巖動(dòng)脈缺血損傷模型，均行左側(cè)手術(shù)。2.動(dòng)物分組及取材:采用35只SD雄性大鼠進(jìn)行試驗(yàn)，隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)5只、損傷組(PAI)25只、正常對(duì)照組(NC)5只。損傷組分為5個(gè)亞組:損傷后

2、1d組(1 d)、損傷后3d組(3 d)、損傷后7d組(7 d)、損傷后14d組(14d)和損傷后21d組(21d)，每組5只，建立顳骨內(nèi)段面神經(jīng)巖動(dòng)脈缺血損傷模型，均行左側(cè)手術(shù)。假手術(shù)組和正常對(duì)照組均在術(shù)后7d提取面神經(jīng)核團(tuán)。3.檢測(cè)指標(biāo):用RT-PCR技術(shù)測(cè)定各組中面神經(jīng)元nNOS和NIDD在mRNA水平的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化;用WB技術(shù)測(cè)定各組中面神經(jīng)元nNOS和CAPON在蛋白水平的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化。
　　結(jié)果：1.RT-PCR結(jié)果顯

3、示，NC組和Sham組比較，nNOS表達(dá)水平未見(jiàn)明顯差異(P＞0.05);nNOS mRNA在面神經(jīng)核的表達(dá)，相對(duì)于Sham組，術(shù)后1d組及3d組的表達(dá)均明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），隨后降低至正常水平。2.RT-PCR分析表明， NC組和Sham組比較，NIDD表達(dá)水平未見(jiàn)明顯差異(P＞0.05）;NIDD mRNA在面神經(jīng)核的表達(dá)，相對(duì)于Sham組，NIDD mRNA表達(dá)僅在7d時(shí)有顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜

4、0.05）;其他各組均接近正常水平。3.WB結(jié)果顯示，NC組和Sham組比較，nNOS蛋白表達(dá)水平未見(jiàn)明顯差異（P＞0.05）;nNOS蛋白在面神經(jīng)核的表達(dá)，相對(duì)于Sham組，術(shù)后1d組及3d組的表達(dá)均明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），其余各組與Sham組比較，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。4.WB分析表明，NC組和Sham組比較，CAPON表達(dá)水平未見(jiàn)明顯差異(P＞0.05); CAPON蛋白在面神經(jīng)核的表達(dá)，相對(duì)

5、于Sham組，CAPON蛋白表達(dá)在術(shù)后1d時(shí)有顯著增加并達(dá)到高峰，并持續(xù)高表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：1.面神經(jīng)缺血損傷后，nNOS在面神經(jīng)元中的表達(dá)呈現(xiàn)出早期急劇升高隨后降低的動(dòng)態(tài)趨勢(shì)，提示nNOS在面神經(jīng)缺血早期過(guò)度表達(dá)，誘導(dǎo)面神經(jīng)元繼發(fā)損傷和死亡;中晚期保持正常水平，參與神經(jīng)元再生和修復(fù)。2.面神經(jīng)損傷后，NIDD在面神經(jīng)核團(tuán)中的表達(dá)升高在nNOS的表達(dá)高峰后一過(guò)性出現(xiàn)，提示NIDD表達(dá)與nNOS表