聯(lián)合應(yīng)用骨髓基質(zhì)細胞與bcl-2基因治療大鼠局灶性腦缺血后bFGF的表達研究.pdf

1、目的: 本實驗通過骨髓基質(zhì)細胞(BMSCs)與bcl-2基因聯(lián)合應(yīng)用來治療大鼠局灶性腦缺血，觀察BMSCs凋亡情況，bcl-2蛋白表達水平，神經(jīng)功能恢復(fù)情況，同時檢測堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)表達是否增加，來研究兩種因素聯(lián)合應(yīng)用是否有協(xié)同作用。 方法: 40只大鼠制作成大腦中動脈缺血(MCAo)模型，隨機分為：空白對照組，單純bcl-2組，單純BMSCs組和實驗組(BMSCs+bcl-2)，每組10只。分

2、別于造模后3小時和24小時經(jīng)頸動脈和尾靜脈注入pLXSN-bcl-2質(zhì)粒和Brdu標(biāo)記的BMSCs，大鼠神經(jīng)功能評分；每組再按照缺血再灌注后3天，14天分為2個亞組，每組5只，免疫組化法觀察bFGF表達水平，bcl-2蛋白表達水平，BrdU標(biāo)記的BMSCs在腦內(nèi)的分布及數(shù)量，TUNEL法檢測腦內(nèi)細胞凋亡情況。全部資料采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析。各組數(shù)據(jù)均以Means±SD表示，P<0.05表示差異有顯著性。 結(jié)果

3、: 1．實驗組3天神經(jīng)功能評分明顯小于空白對照組(P<0.05)，14天神經(jīng)功能評分明顯小于其余3組(P<0.05)； 2．實驗組腦內(nèi)細胞凋亡在各個時間點較其余3組明顯減小(P<0.05)，單純BMSCs及單純bcl-2腦內(nèi)細胞凋亡在各個時間點較空白對照組明顯減小(P<0.05)。 3．實驗組和單純BMSCs組在梗死半球側(cè)可見大量BrdU陽性的BMSCs細胞，主要存在于梗死灶周邊，對側(cè)半球也可見少量BrdU陽性細

4、胞。實驗組3天、14天BrdU陽性細胞數(shù)明顯多于單純BMSCs組。 4．實驗組bFGF表達水平在各個時間點較單純BMSCs、單純bcl-2組及空白對照組明顯增加(P<0.05)單純BMSCs及單純bcl-2組在各個時間點較空白對照組明顯增加(P<0.05)5．實驗組3天、14天梗死灶側(cè)bcl-2蛋白表達水平明顯高于其余3組(P<0.05)。 結(jié)論：在局灶性腦梗死實驗中，骨髓基質(zhì)細胞與Bcl-2基因均有治療作用，兩者聯(lián)合應(yīng)