腸源性全身炎癥反應(yīng)綜合征中Toll樣受體4表達(dá)的改變及意義.pdf

1、為研究Toll樣受體4表達(dá)改變?cè)谀c缺血再灌注損傷及腸源性多器官功能不全中的作用及意義，我們檢測了腸缺血再灌注損傷大鼠各重要臟器的Toll樣受體4的表達(dá)水平，并觀測其與全身炎癥反應(yīng)及多器官功能不全的關(guān)系，實(shí)驗(yàn)分如下兩部分進(jìn)行： 第一章大鼠小腸缺血再灌注損傷后TLR4基因表達(dá)的改變及意義 目的：觀察大鼠小腸缺血再灌注損傷后小腸組織TLR4的表達(dá)及其與炎癥因子水平變化的關(guān)系。 方法：雄性SD大鼠90只，隨機(jī)分為正常對(duì)照

2、組、假手術(shù)組、小腸部分缺血再灌注損傷組。分別于缺血再灌注后6h、12h、24h和48h，檢測小腸組織TLR4mRNA的表達(dá)，測定門靜脈血清中TNF-α、IL-6的水平并進(jìn)行相關(guān)性分析。用免疫組織化學(xué)法觀察TLR4在小腸組織中的表達(dá)和分布。 結(jié)果 1.SD大鼠缺血再灌注小腸內(nèi)TLR4mRNA表達(dá)上調(diào)，且再灌注12h最強(qiáng)；2.門靜脈血清中炎癥因子IL-6、TNF-α濃度在各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較增高，在缺血再灌注24h后達(dá)到峰值，與假手

3、術(shù)組比較有顯著差異(P<0.01)；3.再灌注損傷組門靜脈IL-6、TNF-α濃度的增高與小腸TLR4mRNA表達(dá)的上調(diào)呈正相關(guān)(r=0.790，r=0.773)；4.免疫組織化學(xué)法顯示小腸組織在缺血再灌注損傷后TLR4表達(dá)明顯增強(qiáng)，且陽性部位主要是小腸粘膜細(xì)胞。 第二章小腸缺血再灌注損傷后大鼠多臟器Toll樣受體4表達(dá)的變化及意義 目的：觀察小腸部分缺血再灌注損傷的SD大鼠主要臟器組織(小腸、肺、肝、腎)TLR4表達(dá)變

4、化，探討TLR4在腸源性多器官功能不全發(fā)生中的作用。 方法：SD大鼠分為正常對(duì)照組、假手術(shù)組及實(shí)驗(yàn)組(缺血再灌注6h，12h，24h)。建立小腸缺血再灌注模型，觀察傷后6h、12h、24h大鼠癥狀改變及重要器官(小腸、肺、肝、腎)的炎性病理變化，用半定量RT-PCR法分別檢測小腸、肺、肝和腎組織中TLR4mRNA表達(dá)變化，并行各組大鼠多器官的TLR4的免疫組織化學(xué)檢查。 結(jié)果：缺血再灌注損傷后，大鼠出現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)綜合癥

5、(SIRS)癥狀，各重要器官有炎性病理改變，各組織TLR4mRNA表達(dá)較正常對(duì)照組及假手術(shù)組均增高。其中以腸道上調(diào)最顯著，于12h達(dá)峰值，升高幅度最大(P<0.05)；肺臟、肝臟及腎TLR4表達(dá)均明顯上調(diào)。 結(jié)論： 1.大鼠小腸缺血再灌注損傷后，小腸組織TLR4的表達(dá)上調(diào)是導(dǎo)致腸粘膜屏障功能下降及系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)的重要環(huán)節(jié)。 2.小腸缺血再灌注損傷后大鼠小腸、肺、肝、腎組織中TLR4表達(dá)均升高，小腸升高最明顯，在腸