阿魏酸鈉對大鼠肝纖維化以及LX-2細胞增殖的作用.pdf

1、【背景及目的】肝硬化是各種慢性肝病進展的結果，其病理生理表現為細胞外基質產生過多，降解減少，導致肝臟中細胞外基質大量沉積，肝臟正常解剖結構被破壞，引起一系列臨床表現及并發(fā)癥。目前認為活化的肝星狀細胞是細胞外基質的主要來源，所以肝星狀細胞活化是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。正常情況下肝星狀細胞活化處于靜息狀態(tài)，胞漿內富含脂滴。在各種促纖維化因素的刺激下，肝星狀細胞活化，轉變?yōu)榧〕衫w維樣細胞，獲取一系列表型：收縮性、增殖性、遷移性、分泌細胞外基質增多

2、等。阿魏酸鈉具有抗氧化、抗炎作用，可對多種疾病產生治療作用，包括減少肝毒性藥物導致的肝損傷。而關于阿魏酸鈉對肝纖維化的作用，目前研究較少。本實驗旨在通過研究阿魏酸鈉對膽管結扎肝纖維化大鼠肝臟病理組織學、超微結構的作用以及對肝星狀細胞系LX-2和HSC-T6增殖的影響，來探討阿魏酸鈉對肝纖維化的作用，為進一步實驗研究和臨床治療提供思路和依據。
　　【方法】組織水平研究：實驗大鼠隨機分為三組，分別是SHAM組、BDL+NS組、BDL+

3、SF組，膽管結扎法制作大鼠肝纖維化模型，然后分別做不同處理。處死大鼠，取出肝臟，制作切片，分別做HE染色、電鏡觀察，來說明阿魏酸鈉對大鼠肝纖維化的作用。細胞水平研究：培養(yǎng)良好的LX-2和HSC-T6各分成四組，分別為對照組、不同濃度阿魏酸鈉處理組（0.04mg/ml，0.12mg/ml，0.36mg/ml），藥物處理48h后，BrdU/PI雙標流式細胞術檢測HSC-T6細胞系增殖，比較處于S期細胞的比例。CCK-8法檢測LX-2細胞系增

4、殖，比較各組OD（吸光度）值。
　　【結果】組織水平研究：BDL+NS組及BDL+SF組大鼠與假手術組相比，HE染色切片中均有不同程度肝細胞壞死及纖維化，而與 BDL+NS組相比，BDL+SF組大鼠肝細胞壞死和纖維化程度明顯降低。此外，電鏡觀察顯示 BDL+NS組肝細胞壞死嚴重、胞漿內各細胞器損害明顯、間質見大量纖維聚集。而相比于BDL+NS組，BDL+SF組肝細胞內可見輕度脂肪變性，間質偶見少量纖維聚集，肝細胞損害和間質纖維化程

5、度明顯低于BDL+NS組。細胞水平研究：阿魏酸鈉處理組 LX-2細胞 OD值明顯低于對照組(0.27954±0.035321,0.27624±0.049625,0.17122±0.00772 vs.0.3584±0.028664，p<0.05),而且，隨著阿魏酸鈉濃度的增高，OD值逐漸下降。阿魏酸鈉處理組HSC-T6細胞系S期細胞比例與對照組相差不大（37.4％，35.9%，32.3%vs.34.4%）。
　　【結論】阿魏酸鈉顯著