遲發(fā)性耳聾家系相關(guān)基因突變研究.pdf

1、目的:探索遺傳性耳聾家系的相關(guān)基因，為耳聾家庭提供一定的遺傳咨詢及婚育指導(dǎo)。耳聾是人類交流障礙最常見(jiàn)的疾病，遺傳因素為其目前最主要的病因，而聽(tīng)力正常人群亦可能攜帶一定的致聾基因變異，這也是耳聾發(fā)病率居高不下的重要原因之一。隨著國(guó)內(nèi)外研究人員對(duì)遺傳性耳聾的探索，已確定的致聾基因日益增加，仍有部分耳聾基因未被發(fā)現(xiàn)。本課題分析研究了2個(gè)遲發(fā)性語(yǔ)后聾家系，確定致聾基因，豐富遺傳性耳聾基因的突變譜。
　　方法:收集耳聾家系，采集病例信息，2

2、個(gè)家系分別編號(hào)為:HBX、HBJ。對(duì)家系成員做聽(tīng)力檢查確定耳聾患者數(shù)并初步判定遺傳性質(zhì)，收集家系成員的外周靜脈血液樣本，提取基因組DNA，PCR擴(kuò)增后進(jìn)行樣本測(cè)序，首先篩查我國(guó)一線致聾基因，包括GJB2、SLC26A4以及線粒體基因12S rRNA。篩查結(jié)果為陽(yáng)性者，分析患者的臨床表型與基因型的相關(guān)性，提供遺傳咨詢于耳聾患者及家庭成員;結(jié)果為陰性者，進(jìn)一步行耳聾基因組高通量測(cè)序，對(duì)可疑的致病基因進(jìn)行分析，結(jié)果為陽(yáng)性者，對(duì)該突變點(diǎn)進(jìn)行PC

3、R擴(kuò)增，擴(kuò)增后產(chǎn)物可行Sanger測(cè)序驗(yàn)證;檢測(cè)結(jié)果仍為陰性者，將考慮行全外顯子組測(cè)序。
　　結(jié)果:
　　1.本課題組首次發(fā)現(xiàn)了中國(guó)人群中較少見(jiàn)的KCNQ4基因突變，c.887G＞A，該位點(diǎn)突變位于KCNQ4基因第6外顯子，直接導(dǎo)致氨基酸(p.G296D)的錯(cuò)義突變，c.887 G＞A突變?cè)诔Ｈ旧w顯性遺傳的非綜合征型耳聾家系（HBJ家系）內(nèi)與耳聾表型呈共分離狀態(tài)，此突變位點(diǎn)在電壓-門控鉀通道的其他家族成員中具有高度保守性。

4、該家系患者均為語(yǔ)后聾，發(fā)病年齡在15～25歲，表現(xiàn)為感音神經(jīng)性耳聾，患者早期表現(xiàn)為高頻聽(tīng)力下降，而后逐漸累及中、低頻。該突變尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　2.在另一個(gè)常染色體顯性遺傳的非綜合癥型耳聾家系(HBX家系)中未檢測(cè)出基因的明確突變，家系內(nèi)耳聾患者臨床表型一致，發(fā)病年齡在10～20歲，語(yǔ)后聾，均為感音神經(jīng)性耳聾，聽(tīng)力圖示全頻聽(tīng)力下降?；谙乱淮鷾y(cè)序技術(shù)及外顯子捕獲新一代技術(shù)，利用耳聾基因組高通量測(cè)序，未發(fā)現(xiàn)明確的致聾基因，提示此家系可