MG63和MG63-ADR骨肉瘤裸鼠模型的建立及VEGF和NF-κB1基因在骨肉瘤裸鼠模型中表達的意義研究.pdf

1、骨肉瘤是青少年最常見的骨原發(fā)惡性腫瘤,雖然保肢手術和新輔助化療方案的實施使骨肉瘤的預后有很大的提高,但是相當一部分患者因多藥耐藥而預后不良,因此迫切需要對骨肉瘤耐藥機制進行更深入的研究。前期工作中我們應用基因芯片技術檢測到VEGF和NF-κB1基因可能與骨肉瘤耐藥相關,本次課題我們建立骨肉瘤動物模型并將圍繞這兩個基因,通過免疫組化和RT-PCR技術進一步驗證VEGF和NF-κB1基因在骨肉瘤MG63耐藥細胞株和親本細胞株的表達情況,為進

2、一步探討骨肉瘤的耐藥機制和尋求更有效的治療靶點提供實驗依據(jù)。
　　 第一章 MG63和MG63／ADR骨肉瘤裸鼠模型的建立
　　 目的:建立MG63和MG63／ADR骨肉瘤裸鼠模型。
　　 方法:采用阿霉素濃度遞增培養(yǎng)法,建立人骨肉瘤MG63的多藥耐細胞株MG63／ADR。BALB／C裸鼠隨機分為兩組,分別將MG63和MG63／ADR細胞采用皮下接種法注入裸鼠的一側腋部皮下建立骨肉瘤裸鼠模型。
　　 結果

3、:與MG63細胞比較,MG63／ADR細胞G0／G1期細胞減少10.61％,S期細胞增加15.06％。該細胞株對多種抗腫瘤藥物耐藥,MG63／ADR對阿霉素的耐藥指數(shù)是親本細胞的9.09倍,對順鉑(DDP)、甲氨蝶呤(MTX)、表阿霉素(EPB)、長春新堿(VCR)四種藥物耐藥指數(shù)均顯著增加。接種MG63和MG63／ADR細胞后,裸鼠均于1周左右成瘤,兩組在接種部位均有腫瘤生長,成瘤率100％。
　　 結論:成功建立MG63和M

4、G63／ADR骨肉瘤裸鼠模型,為進一步開展骨肉瘤耐藥相關研究提供了實驗模型。
　　 第二章 VEGF和NK-κB1基因在骨肉瘤裸鼠模型中的表達及其意義
　　 目的:檢測MG63和MG63／ADR骨肉瘤裸鼠模型中VEGF和NF-κB1基因表達的差異及其意義。
　　 方法:建立MG63和MG63／ADR骨肉瘤裸鼠模型后,第6周處死裸鼠,采用免疫組織化學及RT-PCR的方法檢測兩組瘤灶中VEGF和NF-κB1基因表達的