熱休克蛋白70、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94和免疫球蛋白G在胎盤腫瘤中的表達、共定位及其意義的研究.pdf

1、熱休克蛋白(heatshockprotein，HSP)是細胞受到各種刺激時產(chǎn)生的一類具有重要生理功能和高度保守的多肽類蛋白質(zhì)分子家族,普遍存在于原核和真核生物細胞中，在應(yīng)激狀態(tài)下可被誘導(dǎo)表達。在哺乳動物的細胞中，熱休克蛋白被分為Hsps和Grps，HSP70和GRP94分別是他們中的一員，在正常細胞的生長和發(fā)展的過程中，HSP70和GRP94持續(xù)地處于低表達狀態(tài)，但當處于應(yīng)激狀態(tài)時將持續(xù)高表達。研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在腫瘤細胞中在沒有任何刺激下H

2、SP70和GRP94都將高表達并且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)系。在過去免疫球蛋白G被認為是人類免疫系統(tǒng)最普遍和最重要的蛋白且只能由分化成熟的B淋巴細胞分泌，最近的研究發(fā)現(xiàn)一些人類腫瘤也能產(chǎn)生IgG。HSP70在葡萄胎中的表達以及HSP70與IgG在肝癌共定位的關(guān)系已有相關(guān)文獻的報道，但關(guān)于HSP70，GRP94和IgG在胎盤腫瘤的表達以及HSP70和GRP94分別與IgG的關(guān)系尚未見報道。
　　本課題研究目的：(1).探討HSP70，G

3、RP94和IgG在胎盤腫瘤中的表達及意義。(2).研究HSP70，GRP94與IgG的共定位關(guān)系及其意義，為腫瘤細胞內(nèi)免疫機制的存在提供一定的依據(jù)。方法:(1).利用免疫組化研究HSP70，GRP94和IgG在胎盤腫瘤中的表達，同時利用Image-ProPlus進行抗原表達量的分析。(2).利用免疫熒光雙標,激光共聚焦顯微鏡分析并初步證實在胎盤腫瘤組織和絨毛膜癌細胞系中存在HSP70，GRP94和IgG的共定位。(3).利用RT-PCR

4、證明HSP70，GRP94和IgG的基因表達。結(jié)果：免疫組化的結(jié)果顯示39例葡萄胎有31例表達HSP70，陽性率為79.4％，有34例表達GRP94，陽性率為87.1％，有35例表達IgG，陽性率為89％。20例絨毛膜癌中有15例表達HSP70，陽性率為75％，有16例表達GRP94，陽性率為80％，有18例表達IgG，陽性率為90％。HSP70在胞漿胞核中均表達，主要表達在胞核中，GRP94和IgG主要表達在胞漿中，而且HSP70，G

5、RP94在絨毛膜癌中細胞的表達要比在葡萄胎中細胞的表達強(P=0.03，P=0.04)，同時也發(fā)現(xiàn)在葡萄胎中HSP70在細胞滋養(yǎng)層細胞比合體滋養(yǎng)層細胞表達強(P<0.01)，GRP94和IgG是合體滋養(yǎng)層細胞比細胞滋養(yǎng)層細胞表達要強(P<0.01)。另外還發(fā)現(xiàn)在20例絨毛膜癌中HSP70，GRP94和IgG表達都比癌旁組織表達強(P<0.01)，這些結(jié)果表明HSP70，GRP94的表達可能與腫瘤的良惡性程度有關(guān)系。59例胎盤腫瘤組織中4

6、2例有HSP70和IgG的共表達，48例有GRP94和IgG的共表達，通過免疫熒光發(fā)現(xiàn)在部分胎盤腫瘤細胞中可見HSP70，GRP94分別與IgG的共定位，為了排除他們可能來自非特異吸收，我們在體外培養(yǎng)了絨毛膜癌細胞，也發(fā)現(xiàn)存在HSP70，GRP94和IgG的共定位，同時利用RT-PCR證明了HSP70，GRP94和IgG存在基因的表達。結(jié)論：HSP70，GRP94在胎盤腫瘤的表達與胎盤腫瘤的分化程度有關(guān)系，初步證實了HSP70，GRP9