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1、目的:研究葉孟類蒙藥材黃花鐵線蓮(毛茛科植物ClematisintricataBunge.)中細(xì)胞毒生物活性成分。尋找抗腫瘤、抗炎、抗氧化、抗微生物藥物前體。
方法:采集黃花鐵線蓮,對(duì)其進(jìn)行原植物鑒定,為(毛莨科植物ClematisintricateBunge.)。取干燥帶花枝條10.6kg粉碎,用75%乙醇回流提取3次,濃縮醇溶液,得到粗體物浸膏。粗體物浸膏加水懸浮,依次用等體積石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次,減
2、壓回收溶劑。所剩水層濃縮后上聚酰胺色譜柱,依次用水、甲醇-水(1∶1)、甲醇洗脫,減壓回收溶劑,得到7個(gè)不同極性提取物。用海蝦幼蟲致死試驗(yàn)篩選細(xì)胞毒性生物活性部位,運(yùn)用FlashC18色譜柱、硅膠薄層色譜、SephadexLH-20、半制備高效液相色譜(配視差檢測(cè)器)等方法分離提純化合物單體。運(yùn)用四大光譜(紫外、紅外、核磁共振、質(zhì)譜)解析化合物平面結(jié)構(gòu)。用核磁數(shù)據(jù)偶合常數(shù)確定化合物立體結(jié)構(gòu)。通過理化性質(zhì)和UV、MS、1HNMR、13CN
3、MR、HMBC等波譜分析方法對(duì)所分離得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
結(jié)果:從黃花鐵線蓮ClematisintricateBunge.的乙酸乙酯層B.S.(LD50=248.2μg/ml)分離得到7個(gè)化合物,鑒定為kaempferol-3-O-α-L-rhamno-pyranosy-(1→6)-β-D-glucopyranoside(1),luteolin-3'-O-β-D-glucopyranoside(2),Caffeica
4、cid(3),Ferulicacid(4),Apigenin(5),Diisobutylphthalate(6),Dibutylphthalate(7)。
從黃花鐵線蓮ClematisintricateBunge正丁醇層B.S.(LD50>1000)分離得到3個(gè)化合物,鑒定為quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside(8),Rutin(9),Apigenin-6-C-(6"-E-p-coumaroy
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