羥氯喹對系統(tǒng)性紅斑狼瘡外周血單個核細胞凋亡及Th17影響的研究.pdf

1、背景：
　　 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，SLE)是一種慢性、多系統(tǒng)受累的，嚴重危害人類健康的自身免疫性疾病，全國患病總人數(shù)高達100萬。迄今為止，其發(fā)病機制尚不完全清楚。目前主要治療方案是糖皮質(zhì)激素聯(lián)合多種藥物如環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤，來氟米特等。羥氯喹廣泛應用于SLE治療，取得了一定療效，在風濕病治療中的作用愈來愈受到重視。但其確切的治療機制尚不完全清楚。近幾年來，我們科在臨床上用HCQ

2、治療過程中發(fā)現(xiàn)SLE患者外周血中白細胞，尤其是淋巴細胞有不同程度的減少。這一現(xiàn)象提示HCQ可能通過對淋巴細胞影響達到緩解病情的目的。通過HCQ對淋巴細胞凋亡及Th17細胞及其分泌的細胞因子IL-17分泌影響的研究，探討Hco治療SLE可能的作用機制。
　　 目的：
　　 1.觀察HCQ對SLE患者外周血單個核細胞(Peripheralbloodmononuclearcells，PBMC)的影響；
　　 2.研究H

3、CQ對SLE患者PBMC凋亡的影響；
　　 3.研究Hco對T淋巴細胞中Th17細胞及IL-17因子表達水平的影響，探討HCQ治療SLE患者可能的作用機制。
　　 方法：
　　 1.臨床部分：納入研究的40例初發(fā)穩(wěn)定期SLE患者隨機分為單用CTX組、HCQ+CTX組，進行比較對淋巴細胞的影響，觀察指標一血常規(guī)中白細胞、淋巴細胞、血沉、補體C3、SLEDAI;隨訪時點：0周（基線）、6周、12周;
　　 2

4、.基礎部分：抽取20例初發(fā)活動期SLE患者外周血，提取PBMC進行培養(yǎng)，用HCQ、NH2不同藥物，不同濃度進行干預，培養(yǎng)24h、48h用流式細胞術檢測PBMC凋亡及Th17細胞表達水平的影響；提取細胞上清液用ELISA檢測IL-17細胞因子的表達。
　　 結果：
　　 1.臨床指標評估
　　 基線時，單用CTX組與HCQ+CTX組比較，WBC、LY、ESR、補體C3、SLEDAI等指標差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.

5、05）;
　　 隨訪6周時，與基線值相比，兩組SLEDAI評分均顯著下降（P＜0.05），但其變化程度及兩組間比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；WBC、LY、ESR、補體C3等療效指標及其變化程度差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；
　　 隨訪12周時，與基線值相比，兩組SLEDAI評分、ESR均顯著下降（P＜0.05），補體C3顯著升高（P＜0.05）；HCQ+CTX組與CTX組比較WBC、LY不同程度下降，但H

6、CQ+CTX組比CTX組更顯著（P＜0.05）；與隨訪6周相比，各療效指標差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；6周到12周SLEDAI評分的下降程度HCQ+CTX組較單用CTX組顯著（P＜0.05）；ESR、補體C3的變化程度兩組間差異無統(tǒng)計學意義。
　　 2.SLE患者提取PBMC培養(yǎng)加入HCQ、NH2兩種藥物、不同劑量，Hco小劑量組（終濃度為5μg/ml）、HCQ大劑量組（終濃度25μg/ml）、NH2小劑量組(終濃度為0

7、.1μg/ml)、NH2大劑量組（終濃度1μg/ml）。用流式細胞術檢測細胞凋亡率結果顯示：24hHCQ(10.325±0.713)％和NH2(8.490±1.065)%(P＜0.05);48hHCQ(18.863±4.101)%和NH2(17.654±3.543)%(P＜0.05)兩者比較均有統(tǒng)計學意義；
　　 3.流式細胞術檢測Th17細胞的百分數(shù)，數(shù)據(jù)顯示SLE患者Hco組與NHz組分別為(0.81±0.13)%和(0.7

8、6±0.26)%，兩組比較有差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；
　　 4.用ELISA檢測SLE患者Hco組與NH2組細胞上清液IL-17分泌水平有差別，兩組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結論：
　　 1.HCQ可以改善SLE患者病情，但引起白細胞，尤其是淋巴細胞不同程度的減少；
　　 2.HCQ治療SLE患者的作用機制，通過體外實驗證明HCQ有誘導PBMC凋亡的作用，HCQ降低PBMC中Th