人黑色素瘤抗原MAGe-A11對p53轉錄活性與穩(wěn)定性的影響.pdf

1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權及知識產(chǎn)權歸屬承諾本學位論文在導師(或指導小組)的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內容相關的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權均歸河北醫(yī)科大學所有。否則，承擔相應法律責任。研究生虢躺藝導師虢燙級學河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指

2、導下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生虢絡、嘻長UN’o一一新磷霉稠知B年’3月27日中文摘要人黑色素瘤抗原MAGEAll對p53轉錄活性與穩(wěn)定性的影響摘要目的：腫瘤抑制基因p53是迄今為止發(fā)現(xiàn)與人類腫瘤相關性最高的一種基因，研究表明50％以上的人類腫瘤都發(fā)生了p53突變。p53主要在細胞周期控制通路

3、如凋亡、細胞生長阻滯以及衰老中起著重要作用。近來，一些研究顯示MAGEA蛋白參與了p53的調節(jié)以及細胞凋亡應答。最近研究表明MAGEA2可以與p53結合，并募集轉錄抑制子組蛋白去乙?；附Y合到p53DNA結合位點上，從而抑制p53的轉錄活性。有研究表明MAGEA3蛋白與KAPl結合后會抑制p53轉錄活性。而有研究提示，MAGEA4發(fā)揮了與該家族其他成員不同甚至是相反的生物學功能，它可以促進p53的轉錄活性以及其功能。本課題旨在研究MAG

4、EA亞家族中MAGEA1l對p53轉錄活性及穩(wěn)定性的影響，旨在了解MAGEA11在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機制。方法：1利用基因轉染、RTPCR和Westernblot實驗方法檢測乳腺癌細胞系MDAMB231中p21WAFlmRNA和蛋白的表達情況。2利用基因轉染和熒光素酶報告基因分析實驗方法檢測乳腺癌細胞系MDAMB231中p21黼1啟動子介導的熒光素酶活性的表達情況，從而探討MAGEA11對p53轉錄活性的影響。3利用基因轉染和克隆形成

5、實驗的方法來檢測在不同的體外轉染條件下乳腺癌MDAMB231細胞增殖的情況，進一步分析MAGEA11對p53功能的作用。4利用半定量RTPCR和Westernblot方法分析人乳腺癌細胞系MDAMB231中轉染不同量的MAGEA11質粒之后，p53在轉錄水平和翻譯水平上的表達，并進一步分析MAGEA11對p53穩(wěn)定性影響的情況。5利用基因轉染、放線菌酮蛋白抑制分析和Westernblot方法檢測乳腺癌細胞系MDAMB231中MAGEA1