硫酸軟骨素和氨基葡萄糖制備及檢測方法的研究.pdf

1、硫酸軟骨素和氨基葡萄糖作為天然有機提取物，兩者所具有的獨特生物活性及功能，使其應(yīng)用范圍逐步擴大，經(jīng)濟效益和社會效益迅速提高。加之其原料資源豐富，價廉易得，適于大規(guī)模制備，成為目前天然提取產(chǎn)物的研究熱點之一。本文以牛軟骨和殼聚糖為原料，分別研究了硫酸軟骨素和氨基葡萄糖的制備工藝及其檢測方法。 試驗建立了牛軟骨中硫酸軟骨素蛋白酶酶解提取工藝。采用四因素三水平中心組合旋轉(zhuǎn)設(shè)計優(yōu)化牛軟骨中硫酸軟骨素的酶法提取工藝條件為：水解溫度55℃、

2、pH11、酶添加量25mg、14倍液料比的條件下水解7小時，硫酸軟骨素得率為32.45％。 試驗建立了溫和條件降解殼聚糖制備氨基葡萄糖的工藝。通過正交試驗優(yōu)化確定了果膠酶BE3-L降解殼聚糖的酶解作用條件為：料液比1∶60，水解時間9h，溫度50℃，酶添加量2.0mL。在酶解殼聚糖基礎(chǔ)上，調(diào)整酶解液酸濃度為6mol/L，70℃加熱水解制備氨基葡萄糖，建立了較為溫和的氨基葡萄糖制備工藝。 試驗分別建立了硫酸軟骨素和氨基葡萄

3、糖的檢測方法。硫酸軟骨素定量檢測條件為：在濃度為8mol/L的鹽酸下，沸水浴水解60min，顯色15min。顯色后在波長554nm處測定，結(jié)果表明：硫酸軟骨素濃度在0.20～1.00mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其回歸方程為：A=0.631C+0.04，相關(guān)系數(shù)R2=0.9994。氨基葡萄糖定量檢測條件為：60℃恒溫水浴，氨基葡萄糖鹽酸鹽與鹽酸吡哆醛縮和反應(yīng)30min后，加入Zn2+60℃水浴絡(luò)合30min，衍生后在EX386nm，EM