消散因子石英晶體微天平和熒光猝滅動態(tài)監(jiān)測表沒食子兒茶素沒食子酸酯與人唾液的相互作用.pdf

1、目的：采用QCM-D在體外原位、實時和動態(tài)監(jiān)測人全唾液(WS)、腮腺唾液(PS)和下頜下腺/舌下腺唾液(SMSLS)在HA芯片表面吸附和解離的過程。通過自組裝單層膜(SAM)的WS和PS，測量EGCG對WS和PS生物膜的吸附和解離的過程。采用熒光猝滅實驗，以考察EGCG猝滅WS和PS的效果。 方法：收集刺激性的上述三種唾液，監(jiān)測唾液蛋白吸附于HA芯片表面以及SAM的WS和PS吸附EGCG所造成的頻率改變(△F)和消散因子變化(△

2、D)，及形成生物膜的質(zhì)量(m)、厚度(h)、剪切彈性模量(μ)和剪切粘度(η)。根據(jù)Langmuir(L)和Freundlich(F)吸附等溫線的相關(guān)系數(shù)判斷EGCG在WS和PS膜表面的吸附模型，計算吸附動力學(xué)常數(shù)：L常數(shù)(K)、飽和吸附量(Mm)、F常數(shù)(Kf)、F吸附強度常數(shù)(1/n)。采用EGCG作為WS和PS的熒光猝滅劑，考察EGCG猝滅WS和PS的效果和猝滅類型，計算表觀靜態(tài)猝滅常數(shù)(K)、靜態(tài)猝滅常數(shù)(Ks)、表觀靜態(tài)猝滅結(jié)

3、合常數(shù)(KA)、靜態(tài)猝滅結(jié)合常數(shù)(KLB)和結(jié)合位點數(shù)(n)。 結(jié)果：SMSLS的蛋白質(zhì)吸附量最大，形成的膜最厚，PS最小，WS介于兩者中間。SMSLS膜的硬度最小，膜的流動性最大，剪切彈性模量和剪切粘度最小。WS膜的硬度介于PS和SMSLS之間。PS膜表面形成EGCG吸附層后，剪切彈性模量和剪切粘度變小。WS膜含水量大，吸附EGCG后部分水分被擠出，因此剪切彈性模量和剪切粘度增大。采用L和F吸附等溫式均可合理表征EGCG對WS