陽春砂雜交種“春選1號-F4”的成分及藥效評價研究.pdf

1、目的:
　　陽春砂雜交新種“春選1號-F4”（以下簡稱春選1號-F4）為陽春砂傳統(tǒng)優(yōu)良農(nóng)家栽培品種“長果2號”（Amomum villosum Lour.‘Longfruit'，母本）與海南砂（父本）Amomum longiligularg T.L.wu雜交并經(jīng)過4代定向選育所得雜交品種，本課題組前期工作已對其種質(zhì)特性、植株形態(tài)、產(chǎn)量及分子遺傳特性進(jìn)行了調(diào)查研究，但尚未對其有效成分含量、揮發(fā)油含量及其組分進(jìn)行研究，更缺乏相關(guān)藥理藥

2、效實驗研究。為此，本研究將通過測定春選1號-F4總揮發(fā)油含量、乙酸龍腦酯含量、揮發(fā)油組分及其相對含量，并根據(jù)砂仁的臨床功能主治，對春選1號-F4揮發(fā)油進(jìn)行藥理活性研究;此外，對春選1號-F4多糖進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)活性研究，以期豐富及完善春選1號-F4的質(zhì)量評價，為解決傳統(tǒng)栽培類型陽春砂授粉難題、擴(kuò)大陽春砂種質(zhì)資源奠定基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1.分別采用水蒸氣蒸餾法、GC法及GC-MS法測定、分析春選1號-F4與長果2號揮發(fā)油含量、

3、有效成分及揮發(fā)油組成。研究兩者有效成分含量及揮發(fā)油組分的差異。從化學(xué)成分角度探討雜交新種的種質(zhì)特性。
　　2.采用番瀉葉致小鼠腹瀉模型，以蒙脫石散為陽性藥，灌胃給予10％番瀉葉水煎劑，觀察并記錄4h內(nèi)小鼠排出的濕糞粒數(shù)，對比考察春選1號-F4及其長果2號揮發(fā)油對小鼠腹瀉的影響。
　　3.建立二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型，以醋酸地塞米松片為陽性藥，計算各組小鼠耳腫脹度平均值和耳腫脹抑制率;考察春選1號-F4揮發(fā)油對小鼠耳郭腫脹的影

4、響。
　　4.建立醋酸致小鼠疼痛模型，以羅通定片為陽性藥，考察春選1號-F4及長果2號揮發(fā)油對小鼠扭體反應(yīng)潛伏期及小鼠疼痛扭體次數(shù)的影響。
　　5.通過分光光度法測量胃內(nèi)色素殘留物的吸光度值，計算相對胃內(nèi)色素殘留率;同時量取幽門括約肌至色素最前端及至盲腸的距離，計算小腸推進(jìn)比，考察春選1號-F4及長果2號揮發(fā)油對正常小鼠胃排空及小腸推進(jìn)功能的影響。
　　6.取家兔離體空腸，利用生物機(jī)能系統(tǒng)記錄不同藥物對空腸自發(fā)活動的影

5、響，考察春選1號-F4及長果2號的揮發(fā)油對離體兔空腸自發(fā)活動的影響。
　　7.以環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)建立免疫能力低下小鼠模型，考察春選1號-F4多糖對免疫低下小鼠免疫器官重量的影響、對免疫低下小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能影響、對環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫低下小鼠脾溶血素生成的影響。
　　成果:
　　1.春選1號-F4果實揮發(fā)油（≥3％，mL/g）及主要有效成分乙酸龍腦酯的含量(≥9.0mg/g)均符合藥典要求，但春選1號-F4的揮發(fā)油含量較長果

6、2號高并具有顯著差異，春選1號-F4所含乙酸龍腦酯含量略低于長果2號;兩者揮發(fā)油組分略有差異，共有相同組分14種。
　　2.春選1號-F4和長果2號揮發(fā)油均具有顯著的止瀉作用，但兩者止瀉作用無顯著性差異(P＞0.05)，其止瀉效果與蒙脫石散相當(dāng);兩者揮發(fā)油均可極顯著減輕二甲苯致炎小鼠的耳腫脹度，其抗炎效果與醋酸地塞米松片相當(dāng)，且二者對二甲苯致耳腫脹的抑制作用相當(dāng);兩者揮發(fā)油具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，鎮(zhèn)痛效果相當(dāng)，其鎮(zhèn)痛效果可媲美羅通定片

7、;春選1號-F4與其母本揮發(fā)油高劑量均顯著抑制小鼠胃排空，中、低劑量促進(jìn)小鼠胃排空，兩者對小鼠胃排空具有雙向調(diào)節(jié)作用，且效果相當(dāng);春選1號-F4與其母本揮發(fā)油高、中劑量均促進(jìn)小腸推進(jìn)作用，低劑量無明顯作用，兩者對小腸推進(jìn)作用效果相當(dāng)，且與西沙必利藥效相似;春選1號-F4與其母本揮發(fā)油均能顯著抑制家兔離體空腸自發(fā)活動，且其效果優(yōu)于阿托品，春選1號-F4揮發(fā)油低劑量的抑制作用優(yōu)于長果2號。
　　3.春選1號-F4多糖能增加免疫低下小鼠

8、的免疫器官重量、提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬廓清能力和速度、提高小鼠血清溶血素抗體含量，促進(jìn)綿羊紅細(xì)胞所致小鼠抗體的生成。與長果2號陽春砂多糖免疫調(diào)節(jié)活性作用相當(dāng)。
　　結(jié)論:
　　上述研究表明，春選1號-F4主要化學(xué)成分與其母本相似;春選1號-F4揮發(fā)油及多糖具有與長果2號相同的藥理作用，且活性相當(dāng)。說明春選1號-F4不僅具有優(yōu)良的種質(zhì)特性，且藥效功能與其母本長果2號相當(dāng)，作為雜交新種，值得推廣，本研究為解決陽春砂自然授粉難