食管鱗癌患者特異血清microRNA表達(dá)譜的篩選及其臨床意義的研究.pdf

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：l、堅(jiān)持以“求實(shí)、創(chuàng)新”的科學(xué)精神從事研究工作。2、本論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。3、本論文中除引文外，所有實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實(shí)的。4、本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。5、其他同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了聲明并表示了謝意?！髡吆灻喝掌冢簩W(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解南京師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，

2、學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國(guó)家主管部門或其指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版；有權(quán)將學(xué)位論文用于非贏利目的的少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書館被查閱；有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索；有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。作者簽名：乏鱉日期：12』Q。羔叢摘要摘要食管鱗狀細(xì)胞癌(esophagealsquamouscellcarcinoma，ESCC)是一種原發(fā)于食管的惡性腫瘤，占食管癌90％以上，進(jìn)

3、行性吞咽困難為其典型的臨床表現(xiàn)。ESCC具有高發(fā)病率、高死亡率和低檢出率的二高一低特點(diǎn)，男性發(fā)病率高于女性。我國(guó)是ESCC發(fā)病率最高的國(guó)家之一，某些地區(qū)發(fā)病率高達(dá)130／10萬。淋巴結(jié)非轉(zhuǎn)移患者術(shù)后五年生存率為20％30％，而轉(zhuǎn)移患者術(shù)后五年生存率僅為13％，因此ESCC的早期診斷具有極大的臨床意義。然而現(xiàn)有的ESCC檢查手段包括食管脫落細(xì)胞學(xué)檢查、X線檢查、CT檢查、內(nèi)鏡檢查、超聲內(nèi)鏡檢查等無法實(shí)現(xiàn)早期診斷，臨床上也沒有ESCC特異的

4、腫瘤標(biāo)志物。微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是一類長(zhǎng)度約為19一24個(gè)核苷酸的非編碼單鏈小分子RNA，與靶mRNA序列的3’端非翻譯區(qū)以堿基配對(duì)方式完全或不完全互補(bǔ)結(jié)合，抑制靶基因表達(dá)或促使靶基因降解。一些miRNA具有腫瘤組織特異性，其在腫瘤組織中的表達(dá)水平相對(duì)于正常組織發(fā)生了顯著變化，與腫瘤密切相關(guān)，被稱為“OncomiRNA”。最新研究發(fā)現(xiàn)，血清中也存在豐富、穩(wěn)定的miRNA，在研究的幾種癌癥包括前列腺癌、結(jié)腸癌和胰腺

5、癌等患者血清中miRNA表達(dá)譜呈現(xiàn)特異性變化，且這種變化可見于早期患者，提示血清miRNA可作為一種潛在的新型標(biāo)志物，實(shí)現(xiàn)腫瘤的早期診斷。因此，我們推測(cè)ESCC患者血清中也存在其特異的miRNA表達(dá)譜，這種特異血清miR_NA表達(dá)譜有可能成為一種ESCC早期診斷標(biāo)志物?！康模汉Y選出ESCC患者特異血清miRNA表達(dá)譜，評(píng)價(jià)其對(duì)ESCC診斷尤其是早期診斷價(jià)值。方法：收集未經(jīng)任何治療的290例ESCC患者血清作為研究標(biāo)本，同時(shí)收集140例

6、年齡、性別匹配的正常人血清作對(duì)照。首先運(yùn)用高通量、高靈敏度的Solexa測(cè)序技術(shù)對(duì)86例非轉(zhuǎn)移、55例轉(zhuǎn)移ESCC患者和40例正常人組成的三份混合血清中692種miR_NA的表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定，初篩ESCC患者與正常人相比表達(dá)顯著上調(diào)的miRNA。然后運(yùn)用準(zhǔn)確的實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(quantitiverealtimePC＆qRTPCR)對(duì)初篩的miRNA在復(fù)篩組(36例ESCC和33例正常血清)中逐N定，篩選出在患者血清中顯著升高的mi