PMX205干預(yù)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞興奮性損傷的研究.pdf

1、目的:探討補(bǔ)體系統(tǒng)活化產(chǎn)物 C5a及其受體拮抗劑 PMX205在 NMDA（N-methyl-D-aspartate,N-甲基-D-天門冬氨酸)介導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGCs)興奮性損傷模型中的作用。
　　方法：健康成年清潔級(jí)SD大鼠65只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組(5只)、PBS組（玻璃體腔注射PBS20只）、NMDA組（玻璃體腔注射NMDA20只）、PMX205+NMDA組（腹腔注射PMX205+玻璃體腔注射NMDA20只）。每組

2、再隨機(jī)分為四小組，分別于玻璃體腔NMDA注射后1h,12h，24h,48h處死。HE染色法觀察各組視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)變化，ELISA檢測(cè)視網(wǎng)膜組織中補(bǔ)體成分C5a的含量變化，Real-time PCR檢測(cè)Brn3a的mRNA表達(dá)變化評(píng)估RGCs的損傷程度。
　　結(jié)果：1.空白對(duì)照眼視網(wǎng)膜各層組織染色均勻、細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰、形態(tài)規(guī)整，RGCs呈圓形或橢圓形、單層排列。玻璃體腔注射NMDA后1h，RGCs水腫、核膜間距加寬、排列紊亂，隨造模

3、時(shí)間的延長(zhǎng)，RGCs數(shù)目明顯減少，內(nèi)叢狀層變薄。與NMDA組中相同處理時(shí)間組比較，PMX205+NMDA組RGCs排列相對(duì)規(guī)整、未見明顯丟失，內(nèi)叢狀層較厚。2.ELISA結(jié)果：視網(wǎng)膜組織中C5a含量在NMDA組處理1h即升高，12h繼續(xù)上升，24h達(dá)高峰，48h下降，NMDA組中除處理1h組與空白對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.06)外，其余處理時(shí)間組與空白對(duì)照組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05),PBS組中各處理時(shí)間組視網(wǎng)膜

4、組織C5a含量分別與空白對(duì)照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05)。3.實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)Brn3a mRNA結(jié)果：NMDA組與空白對(duì)照組比較，隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)，視網(wǎng)膜組織中Brn3a mRNA表達(dá)量呈進(jìn)行性下降，且NMDA組中各處理時(shí)間組Brn3a mRNA表達(dá)量分別與空白對(duì)照組比較，差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01)。與NMDA組的相同處理時(shí)間組比較，PMX205+NMDA組視網(wǎng)膜組織Brn3a mRNA表達(dá)水平均較高，N

5、MDA組和PMX205+NMDA組中除處理1h組相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.07)外，其余3個(gè)處理時(shí)間組分別對(duì)應(yīng)比較，差異均具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01)。PMX205+NMDA組不同處理時(shí)間眼Brn3a mRNA的表達(dá)量分別與空白對(duì)照眼比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01)。
　　結(jié)論：補(bǔ)體系統(tǒng)活化成分C5a可能參與了NMDA介導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞興奮性損傷過程，而其特異性受體拮抗劑PMX205可在一定程度上阻斷