心肌梗死導(dǎo)致的慢性心腎綜合征中免疫激活及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、背景:慢性心力衰竭和慢性腎病往往共存于同一機(jī)體內(nèi)互相惡化，導(dǎo)致心力衰竭加重，晚期腎病進(jìn)展等不良的預(yù)后。臨床研究證實(shí)了心肌梗死后的患者腎功能可發(fā)生慢性的惡化，特別是那些原本就存在腎功能損害的人群中。這種慢性心力衰竭和慢性腎病共存的現(xiàn)象稱之為心腎綜合征。雖然許多證據(jù)提示免疫激活等機(jī)制參與了多種病因?qū)е碌哪I損害進(jìn)程，但是這些機(jī)制是否在心肌梗死誘導(dǎo)的慢性心腎綜合征中發(fā)揮作用還不清楚。
　　目的:1.建立心肌梗死合并切單腎(UNX+MI)，

2、心肌梗死合并Ⅰ型糖尿病這兩個(gè)聯(lián)合損傷大鼠模型，觀察其心、腎結(jié)構(gòu)與功能的改變，并比較其與單純心肌梗死大鼠相關(guān)指標(biāo)的差異。2.觀察心肌梗死12周后各組模型大鼠腎內(nèi)細(xì)胞免疫和體液免疫等指標(biāo)改變的同時(shí)，評(píng)估腎臟血流動(dòng)力學(xué)/血管反應(yīng)性，腎臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等改變。3.探討腎臟免疫激活與心梗后慢性心腎綜合征機(jī)體心、腎功能惡化之間的關(guān)系。4.觀察Rho激酶抑制劑是否能夠改善聯(lián)合損傷大鼠模型中上述免疫機(jī)制等異常并改善心、腎功能。
　　方法:實(shí)驗(yàn)共涉及3

3、個(gè)protocol。Protocol1:假手術(shù)對(duì)照組(Ctr，n=12) vs外科手術(shù)誘導(dǎo)的心肌梗死組(MI，n=12)。Protocol2:切單腎組(UNX，n=11) vs切單腎合并心肌梗死組(UNX+MI，n=11) vs Fasudil治療的切單腎合并心肌梗死組(UNX+ MI+Fas，n=11);Protocol3:糖尿病組(DB，n=11) vs糖尿病合并心肌梗死組(DB+MI，n=11) vs Fasudil治療的糖尿病合

4、并心肌梗死組(DB+MI+Fas，n=11)。心肌梗死12w后檢測(cè)各組大鼠的心、腎結(jié)構(gòu)和功能，同時(shí)采用微導(dǎo)管，多導(dǎo)myograph系統(tǒng)，電子顯微鏡，流式細(xì)胞儀，免疫組化，免疫熒光等檢測(cè)手段檢測(cè)腎血流動(dòng)力學(xué)/血管反應(yīng)性，腎臟中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激以及免疫細(xì)胞的侵潤(rùn)和免疫復(fù)合物的沉積等。
　　結(jié)果:1.心梗12周后，各組大鼠心、腎結(jié)構(gòu)和功能的改變。1.1心功能:心梗12周后，心超檢測(cè)的LVEDD，LVESD，F(xiàn)S，及導(dǎo)管檢測(cè)的dp/dt max

5、，dp/dt min， LVEDP等參數(shù)以及血漿BNP顯示各種模型大鼠心功能均發(fā)生了一定的惡化。但聯(lián)合模型組（UNX+MI及DB+MI）較單純心梗組的改變并不一致:一方面UNX+MI及DB+MI組較MI組的BNP均顯著升高，導(dǎo)管檢測(cè)也顯示DB+MI組較單純MI組的心功能更差。另一方面，切單腎合并心梗組較MI組的導(dǎo)管和心超參數(shù)并未顯示出顯著的差異。1.2腎功能:腎結(jié)構(gòu)和功能的檢測(cè)顯示:心梗12周后各種模型反應(yīng)腎組織纖維化MASSON和TG

6、F-β染色評(píng)分，反應(yīng)腎小球硬化的PAS染色評(píng)分，反應(yīng)足細(xì)胞損傷的nephrin和desmin染色評(píng)分，及反映腎功能損害的微量白蛋白尿及白蛋白肌酐比值(UACR)均發(fā)生顯著改變，且UNX+MI組及DB+MI組的改變較單純MI組更顯著。Fasudil改善了UNX+ MI組及DB+MI組上述結(jié)構(gòu)和功能指標(biāo)的異常。1.3 Rho系統(tǒng):此外，聯(lián)合模型組的Rho信號(hào)途徑——p-ERM/t-ERM的比值顯著上調(diào)，fasudil改善了其p-ERM/t-

7、ERM的比值。
　　2.心梗12周后各模型組的腎臟免疫及相關(guān)機(jī)制的改變。2.1腎血流動(dòng)力學(xué):心梗12周后聯(lián)合模型組——UNX+MI及DB+MI組的腎灌注壓，腎葉間小動(dòng)脈收縮反應(yīng)性，腎靜脈壓，腎重/體重比等均發(fā)生顯著改變，顯示了腎缺血和淤血的并存;且較單純MI組更為顯著，MI組則未顯示出與Ctr組的差異。Fasudil改善了聯(lián)合模型組腎靜脈壓、腎重/體重比及腎葉間小動(dòng)脈的收縮反應(yīng)性。2.2腎內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激:心梗12周后各種模型大鼠腎小球

8、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志物CHOP，GRP78的表達(dá)量均有所增加，且聯(lián)合模型組——UNX+MI組及DB+MI組較單純MI組更為顯著。Fasudil改善了聯(lián)合模型組的腎小球內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。2.3腎內(nèi)免疫系統(tǒng):心梗12周后各種模型大鼠腎侵潤(rùn)的單核細(xì)胞數(shù)(KMNCs)，產(chǎn)IFN-γ，IL-4的CD4+T細(xì)胞比例等均顯著上升。而腎CD3+/KMNCs，CD4+/CD3+，Th17/CD4+，Treg/CD4以及Treg/Th17等比例僅在聯(lián)合損傷模型組——U

9、NX+MI及DB+MI組中出現(xiàn)顯著改變。同時(shí)，電鏡及免疫熒光檢測(cè)顯示聯(lián)合模型組腎小球內(nèi)出現(xiàn)免疫復(fù)合物IgG和補(bǔ)體C4的沉積。同時(shí)，腎內(nèi)CD4+T細(xì)胞侵潤(rùn)比例和IgG沉積量與微量白蛋白尿及血漿BNP呈一定的正相關(guān)性。Fasudil改善了聯(lián)合模型組中絕大多數(shù)免疫指標(biāo)的異常。
　　結(jié)論:心肌梗死誘導(dǎo)的慢性心力衰竭加重了機(jī)體腎臟結(jié)構(gòu)和功能損傷，特別是在獨(dú)腎及有糖尿病腎損害的大鼠模型中，其可能的內(nèi)在機(jī)制為腎血流動(dòng)力學(xué)/血管反應(yīng)性—內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激