虎杖有效組分提取分離及白藜蘆醇分析方法研究.pdf

1、針對虎杖白藜蘆醇提取效率低、提取后藥材殘渣利用率低、產(chǎn)品附加值低等問題，本文對虎杖藥用組分進行發(fā)掘，為虎杖藥材殘渣的充分利用提供支持，根據(jù)生產(chǎn)中白藜蘆醇的檢測需求，建立相應的樣本檢測方法，用來指導工藝改進、降低生產(chǎn)成本，為白藜蘆醇提取率、產(chǎn)品附加值的提高提供借鑒。
　　 本文以水為溶劑，采用微波提取方式，經(jīng)萃取分段過程，重點對水提取液乙酸乙酯萃取相浸膏進行綜合分離，經(jīng)過反復柱層析、制備薄層層析、重結晶等過程得到十種單體化合物，通

2、過TLC、IR、NMR等技術鑒定出大黃素等七種成分，這些成分多具有抗炎、抗菌活性，具有一定的開發(fā)價值，可以為白藜蘆醇提取后虎杖殘渣的綜合開發(fā)和利用提供借鑒。
　　 本文通過繪制白藜蘆醇紫外標準加入曲線實現(xiàn)了對虎杖甲醇提取物中白藜蘆醇的分析檢測，結果顯示該樣本中白藜蘆醇提取率為0.18％，本方法操作簡單，測試成本低，測試精度高，可借此實現(xiàn)提取過程的工藝優(yōu)化。利用HPCE分析技術對虎杖甲醇提取物中白藜蘆醇進行檢測，在優(yōu)化的分離條件下

3、，白藜蘆醇響應峰遷移時間為7.121min，通過對梯度濃度白藜蘆醇峰面積數(shù)據(jù)的采集建立白藜蘆醇HPCE檢測標準曲線方程為y=86591x+1805.7，R2=0.993，線性范圍在0.05～0.80mg/mL之間，線性程度較好，應用至虎杖甲醇提取物的白藜蘆醇檢測，其含量為0.3598mg/L，對UV法檢測的相對誤差為1.49％。該方法實現(xiàn)了虎杖苷和白藜蘆醇的基線分離(R=1.71)，可實現(xiàn)虎杖苷水解工藝的優(yōu)化檢測?；诨瘜W發(fā)光和微流控芯

4、片檢測原理，設計、搭建微流控芯片化學發(fā)光系統(tǒng)，建立光強變化與白藜蘆醇添加濃度之間關系曲線，曲線在1.0×10-9mol/L～1.0×10-5mol/L范圍內呈良好指數(shù)關系，將該方法應用至合成樣本的分析，檢測結果與UV、HPCE檢測相當。該方法利用芯片上微管道作為反應場所，試劑、樣品量少，分析快速、可同時實現(xiàn)抗自由基活性和含量檢測。
　　 利用所建的白藜蘆醇和虎杖苷的HPCE檢測方法對虎杖苷酸水解及酶水解樣本進行分析，比較兩種工藝

5、的水解效率。其中酸環(huán)境下水解1h后白藜蘆醇的含量即達到最高，濃度為197.36mg/L，虎杖苷水解率達到了62.87％。而酵母生長緩慢，24h白藜蘆醇的含量才達到最高，其濃度為123.32mg/L，虎杖苷水解率為35.33％。酶水解反應速度慢，但條件溫和，對白藜蘆醇的破壞較小，在工業(yè)生產(chǎn)中仍然占主體地位。酸環(huán)境水解過程中較高的溫度以及大量H+的存在會催化白藜蘆醇的醇加成反應，致使白藜蘆醇的濃度減少且該過程對設備要求高，但該過程具有反應速

6、度快、水解效率高的特點，可以對反應時間進行嚴格控制或者利用雙相酸水解的方法對產(chǎn)生的白藜蘆醇進行保護，應用前景較好。
　　 本文具有特色的研究體現(xiàn)在：第一，對虎杖水提取物乙酸乙酯萃取層進行綜合提取，提取出七種化合物，多具有抗炎、抗菌、抗氧化活性，為虎杖的綜合利用提供指導；第二，研究了三種白藜蘆醇的分析檢測方法，可以分別對應用于提取物中、水解工藝中及產(chǎn)品中自藜蘆醇的進行測試。第三，利用所建虎杖苷和白藜蘆醇HPCE檢測方法對虎杖苷水解