IL-24-Bax融合分子及其受體誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的初步研究.pdf

1、目的：檢測(cè)人肝癌細(xì)胞株和正常人肝細(xì)胞株IL-24受體表達(dá)譜，初步探討IL-24-Bax融合分子對(duì)肝癌細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用。 方法：應(yīng)用細(xì)胞免疫化學(xué)方法檢測(cè)人肝癌細(xì)胞株(BEL-7402、HepG2、Huh-7、PLC/PRF/5、QGY-7701、SMMC-7721)和正常人肝細(xì)胞株(L02)3個(gè)IL-24受體亞基(IL-20R1、IL-20R2、IL-22R)表達(dá)情況。應(yīng)用分子克隆技術(shù)重組由IL-24cDNA和BaxαcDNA組

2、成的融合基因IL-24-Bax，構(gòu)建表達(dá)載體pcDNA3.1-IL-24和pcDNA3.1-IL-24-Bax，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PLC/PRF/5細(xì)胞，用活細(xì)胞計(jì)數(shù)法和TUNEL法比較二者對(duì)靶細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的效應(yīng)。 結(jié)果：除PLC/PRF/5細(xì)胞全部表達(dá)3個(gè)受體亞基外，其他受檢細(xì)胞(包括肝細(xì)胞)均只表達(dá)IL-20R2和IL-22R。pcDNA3.1-IL-24和pcDNA3.1-IL-24-Bax瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PLC/PRF/5后，Weste

3、rnblot可檢測(cè)到目的蛋白表達(dá)，細(xì)胞免疫化學(xué)染色顯示其定位于細(xì)胞質(zhì)。與空白組和空載體組相比，IL-24及IL-24-Bax可顯著抑制人肝癌細(xì)胞株生長(zhǎng)增殖(P＜0.05)，并顯著增加肝癌細(xì)胞的凋亡百分率(P＜0.05)，且后者的作用強(qiáng)于前者(P＜0.05)。 結(jié)論：不同的肝癌細(xì)胞具有不同的IL-24受體表達(dá)譜，正常肝細(xì)胞甚至具有與肝癌細(xì)胞相同的IL-24受體表達(dá)譜。IL-24選擇性誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的作用可能不通過(guò)已知的受體介導(dǎo)。I