普瑞巴林結(jié)構(gòu)確證及質(zhì)量研究.pdf

1、普瑞巴林是一種新型γ-氨基丁酸(GABA)受體激動(dòng)劑,用于治療神經(jīng)性疼痛,局部發(fā)作性癲癇和焦慮癥。2004年12月美國食品與藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)用于治療糖尿病性周圍神經(jīng)病變的神經(jīng)性疼痛和帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛。其作用機(jī)制是作為配體與α2-δ亞基結(jié)合,后者與電壓依賴性鈣通道有關(guān),通過調(diào)節(jié)鈣通道減少鈣離子進(jìn)入神經(jīng)末梢,使幾種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)釋放減少。在血中不與血漿蛋白結(jié)合,也無肝代謝,通過腎臟排泄,起效快,副作用小且時(shí)間短,多數(shù)病人可以耐受。

2、普瑞巴林為S構(gòu)型光學(xué)手性化合物,目前尚未在國內(nèi)市場上市,也未被國內(nèi)外藥典收載。本文對(duì)重慶醫(yī)藥工業(yè)研究院試制的普瑞巴林(以下簡稱“本品”)進(jìn)行系統(tǒng)的質(zhì)量研究,為科學(xué)制定其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)。重慶醫(yī)藥工業(yè)研究院采用自行設(shè)計(jì)的合成路線得到具有結(jié)晶形態(tài)的普瑞巴林,本文采用紫外(UV)、紅外(IR)、質(zhì)譜(MS)、核磁共振譜(H-NMR,C-NMR)等波譜技術(shù)確證了結(jié)構(gòu),以國外樣品為對(duì)照通過HPLC柱前手性衍生化方法確定了其構(gòu)型;并重點(diǎn)對(duì)本品

3、的有關(guān)物質(zhì)、光學(xué)異構(gòu)體、殘留溶劑和含量測(cè)定進(jìn)行了系統(tǒng)的評(píng)價(jià)研究。有關(guān)物質(zhì)測(cè)定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(Aichrombond AQ C18),以磷酸鹽緩沖溶液(取磷酸二氫鉀0.12g、磷酸氫二鈉0.56g,加水1000ml溶解)-乙腈(95:5)為流動(dòng)相,檢測(cè)波長為205nm,理論板數(shù)按普瑞巴林峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。該測(cè)定條件能與中間體,以及酸、堿、氧化破壞的的降解產(chǎn)物能完全分離。本品合成工藝中使用了二氯甲烷、四氫呋喃、甲苯、異

4、丙醇、異戊醛、乙酸乙酯和丙二酸二乙酯。根據(jù)ICH(人用藥物注冊(cè)技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會(huì))和中國藥典的相關(guān)技術(shù)要求,采用氣相色譜法進(jìn)行了研究,各溶劑達(dá)到很好的分離,滿足其殘留溶劑的測(cè)定要求。利用Na-(5-氟-2,4-二硝基苯基)-L-丙胺酰胺(FDNPAA)為柱前手性衍生化試劑,該試劑的摩爾比在2.96以上與普瑞巴林可定量反應(yīng)生成的化合物可用普通色譜柱分離測(cè)定普瑞巴林中的光學(xué)異構(gòu)體。最佳色譜條件為Inertsil ODS-2柱(5μm,250

5、mmx4.6mm),流動(dòng)相為三乙胺緩沖液(取三乙胺7.0ml,加水1000ml,用磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-乙腈(55:45,V/V),紫外檢測(cè)波長為340nm。普瑞巴林光學(xué)異構(gòu)體衍生物的色譜峰分離度大于4、最小檢測(cè)限為3.79x10-8g/ml(S/N=3),該法準(zhǔn)確、可靠,適用于普瑞巴林或普瑞巴林制劑的質(zhì)量控制。含量測(cè)定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(Aichrombond AQ C18),以磷酸鹽緩沖溶液(取磷酸二氫鉀0.12

6、g、磷酸氫二鈉0.56g,加水1000ml溶解)-乙腈(95:5)為流動(dòng)相,檢測(cè)波長為205nm。建立了普瑞巴林含量的測(cè)定方法,所建立的檢查方法具有良好的專屬性,最小檢出濃度為1.890×10-7(g/ml),在0.2082～1.6656mg/ml的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,線性方程為A=1730.20C+4.608(其中:A-HPLC圖中主峰峰面積,C-樣品溶液濃度),相關(guān)系數(shù)為1.0。方法精密度RSD為0.3％。在以上研究的基礎(chǔ)上,制定了