Th17細胞及其相關(guān)因子CCR6、RORγt在大鼠肺纖維化模型中表達的意義.pdf

1、目的：
　　本研究通過檢測鹽酸博萊霉素（bleomycin.，BLM）誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化模型在不同時間點肺組織中Th17細胞、CCR6、維甲酸受體相關(guān)孤兒受體(retinoid-ralated orphan receptorγt，RORγt)，觀察肺組織病理改變，探討Th17細胞及其相關(guān)因子在肺纖維化發(fā)病中的可能機制。
　　方法：
　　將48只成年雄性 SD大鼠，隨機分為3組:生理鹽水(N,n=18)組、BLM（B,n

2、=18）組、地塞米松(D,n=12)組。NS組氣管內(nèi)灌注生理鹽水，B組、D組氣管內(nèi)灌注BLM(BLM:5mg/Kg)，隨后，在造模7天，N組和B組每日腹腔注射生理鹽水，D組每日腹腔注射地塞米松注射液（1mg/kg）。各組大鼠分別于第7、14、28天處死。HE評價各組各時間點肺組織病理形態(tài)學(xué)變化并測肺組織勻漿中羥脯氨酸（hydroxyproline，HYP）含量；流式細胞計數(shù)檢肺組織Th（T helper Th）17細胞;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反

3、應(yīng)(RT-PCR)測肺組織RORγtmRNA表達水平;免疫組化檢測CCR6表達。
　　結(jié)果：
　　1、大鼠肺纖維化模型各組肺組織病理學(xué)變化：
　　NS組大鼠各時間點肺組織未發(fā)現(xiàn)肺泡間隔水腫、炎性細胞浸潤及纖維化的形成。BLM組大鼠第7天時肺泡腔內(nèi)可見大量炎性細胞浸潤，第14天時炎癥細胞減少，肺泡間隔內(nèi)成纖維細胞顯著增多，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，第28天時肺纖維化程度進一步加重，形成廣泛纖維化。與N組比較，B組、D組在個時間點肺泡

4、炎顯著加重(P＜0.05)；與 B組比較，D組大鼠各時間點肺泡炎及纖維化程度明顯減輕(P＜0.05)。
　　2、肺組織羥脯氨酸(HYP)含量：
　　鹽酸博萊霉素模型組HYP，隨造模時間的延長而逐漸增高；與N組比較，B組、D組在個時間點羥脯氨酸含量明顯升高(P＜0.05)；與B組比較，在個時間點D組的羥脯氨酸含量明顯降低(P＜0.05)。
　　3、CD4+IL-17+Th17細胞、CCR6、RORγtmRNA在大鼠肺組織

5、的表達：B組肺組織的Th17細胞的百分率、CCR6、RORγtmRNA在不同時間點明顯高于 N組（P<0.05），數(shù)值以第7天最高，且呈逐漸降低的趨勢，第28天時仍高于N組。D組與 B組表現(xiàn)出相同的變化趨勢，低于同期 B組，高于 N組，差異具有顯著性（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、在本次研究中，使用博萊霉素誘導(dǎo)大鼠肺纖維化模型成功建立。
　　2、Th17細胞及其相關(guān)因子CCR6、RORγt在大鼠肺纖維化模型中表