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1、該文以聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)和自行制備的O-羧甲基殼聚糖(O-CMC)為原料,分別以5-氟尿嘧啶為抗癌藥物模型,以反義EGFR為基因藥物模型,采用自身設(shè)計(jì)的改良復(fù)乳法制備了載藥和載基因納米微粒;并在此基礎(chǔ)上構(gòu)建與評(píng)價(jià)了同載抗癌藥物與基因的復(fù)合功能納米藥物載體系統(tǒng).各種納米微粒表征結(jié)果顯示:(1)以O(shè)-CMC和PLGA為原料制得的空載納米粒子平均粒徑為222.9nm,粒徑分布指數(shù)為0.109,ζ電位為73.46eV,表面氮元素含
2、量為10.3%,具有明顯的核殼結(jié)構(gòu)和良好的表面親水性;(2)以5-氟尿嘧啶(5-FU)為抗癌藥物模型制得的載藥納米微粒平均粒徑為98.5nm,粒徑分布指數(shù)為0.192,粒子表面ζ電位為61.48eV,表面N元素含量為12.2%,對(duì)5-FU的包載率高達(dá)18.9%;(3)以反義EGFR為基因藥物模型制得的表面吸附加內(nèi)部包載基因的納米微粒平均粒徑為375.3nm,粒徑分布指數(shù)為0.263,ζ電位為-10.67eV.該文用SEM動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)各種納米
3、粒子降解過(guò)程中表面形貌的變化,并連續(xù)追蹤各種納米粒子降解過(guò)程中的質(zhì)量損失和降解介質(zhì)的pH變化.載5-FU納米粒子在PBS中的釋藥行為研究表明:(1)前12小時(shí)的釋藥動(dòng)力學(xué)符合Huguchi方程,具有一級(jí)釋放特性;(2)在20天內(nèi)的釋藥動(dòng)力學(xué)符合零級(jí)釋放特性.作者創(chuàng)新構(gòu)建的表面吸附加內(nèi)部包載基因的納米微粒釋藥動(dòng)力學(xué)方程也具有零級(jí)釋放動(dòng)力學(xué)特性.體外細(xì)胞存活率實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均證實(shí)了PLGA/O-CMC納米粒子有較好的生物相容性;MTT和
4、細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明載藥納米粒子和載基因納米微粒對(duì)TJ905腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用;免疫組化實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)包載基因的納米微粒能有效地抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞中EGFR的表達(dá),從而抑制TJ905人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖.最后用熒光相差顯微鏡和共聚焦顯微鏡動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)了納米粒子的細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程,發(fā)現(xiàn)納米粒子可在不同時(shí)間內(nèi)進(jìn)入細(xì)胞漿和細(xì)胞核.該文構(gòu)建的表面吸附基因且內(nèi)部同時(shí)包載5-FU與基因的復(fù)合功能納米微粒對(duì)基因的包載量顯著提高,并對(duì)腫瘤細(xì)胞有較高的
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