谷物中黃曲霉毒素B1的間接競(jìng)賽爭(zhēng)化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法的研究.pdf

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解直昌太堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)

2、家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名(手寫)別潞簽字日期：∥歸6月￡‘日導(dǎo)師簽名(手寫)：簽字日期：緲“訛仍1年7月。／日鈔

3、l掃摘要mllllllIlllllll|洲I|1lIIIIllmlllllⅧY1942873摘要黃曲霉毒素B，(，彳以a芒似勘局，AFB。)主要是由黃曲霉(彳印哪，』J姻nayU曲、齋_塋妊霉(ASpergnIuSparaSiticu曲瓤集峰啦霉LASpergiiiUS力耐曬)產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，在花生、小麥、棉籽、玉米和稻米等農(nóng)作物中廣泛存在。AFB。是目前最強(qiáng)的一種化學(xué)致癌誘變劑，毒性和致癌性極強(qiáng)，可導(dǎo)致一動(dòng)物的胃癌、肝癌、腎癌等，

4、還可以通過(guò)食物鏈在生物體之間轉(zhuǎn)移對(duì)人和畜的健康造成威脅。許多國(guó)家已規(guī)定了其在各類糧食、食品和詞料中的限量標(biāo)準(zhǔn)，因此，研究準(zhǔn)確、靈敏、快速的AFB。檢測(cè)方法具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究建立了間接競(jìng)爭(zhēng)化學(xué)發(fā)光酶免疫法(ChemilumiIleScenceenzvmeimmunoassay，CLEIA)檢測(cè)食品中的黃曲霉毒素B。，主要研究?jī)?nèi)容如下：1分析了抗原包被濃度、封閉條件、抗體濃度以及反應(yīng)時(shí)間等因素對(duì)于競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)體系的影響，優(yōu)化后各項(xiàng)指標(biāo)為

5、AFBlBSA抗原包被濃度15u臥nL、4℃包被12h15h；5％脫脂奶、37℃封閉lh：抗AFBl單抗稀釋倍數(shù)l：150000；酶標(biāo)二抗稀釋度1：2000；競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)時(shí)間45min。2建立的間接競(jìng)爭(zhēng)CLEIA方法的線性范圍在1563p∥mL一50000p臥nL之間，線性回歸方程為y=23264x43206，《=09924；檢出限達(dá)到867pg／mL，IC50為5496pg／rrlL，批內(nèi)和批間平均變異系數(shù)分別為403％和697％；平均添

6、加回收率為9272％，平均變異系數(shù)為868％。3分別采用間接競(jìng)爭(zhēng)AFBlCLEIA方法和市售AFBlELISA定量檢測(cè)盒測(cè)定32個(gè)樣品(小麥樣5個(gè)、大米樣8個(gè)、玉米樣8個(gè)，花生11個(gè))，其中28個(gè)樣品被AFBl污染，AFBl含量為132ng／I(g3626ng／l(g，兩種方法的結(jié)果無(wú)顯著性差異P00l，R2=09954，顯示出兩種方法的檢測(cè)結(jié)果無(wú)顯著性差異。該方法比市售的AFBlELISA試劑盒的靈敏度提高了576倍。關(guān)鍵詞：黃曲霉毒