葛根美白活性物質(zhì)的分離提取及在化妝品中的應用.pdf

1、本課題主要對中草藥葛根中含有的對皮膚具有美白活性的物質(zhì)進行了研究，包括葛根有效成分的提取，提取工藝的優(yōu)化，和對美白活性成分進行分離純化，并進一步探討了葛根提取物對酪氨酸酶抑制作用的類型和機理，最后對葛根提取物作了一些應用研究。 對葛根，金銀花，六月雪和柿葉四種常用中草藥分別通過水和乙醇回流提取、濃縮、低溫烘干。采用生化酶法測定各提取物的美白活性。分別測定它們的水提取物和乙醇提取物的美白活性，得到葛根的水提物和乙醇提取物對酪氨酸酶

2、的抑制作用強于其它幾種中草藥的提取物。采用單因素實驗法，考察了緩沖溶液的pH值、L-酪氨酸的量、酪氨酸酶的量、恒溫時間和反應時間這五個因素對美白功效實驗體系的影響，得到最佳實驗條件是：pH值為6.85、L-酪氨酸溶液的量為1.0mL、酪氨酸酶的量為0.40mL、恒溫時間為10min、反應時間為5min。 采用三因素四水平正交試驗法對葛根乙醇提物的提取條件進行優(yōu)化，得到最佳工藝條件為：乙醇濃度為75％、回流時間4h、料液比1:8、

3、提取次數(shù)2次。并繪制了葛根素標準品的標準曲線，測定了正交實驗中9次實驗得到的葛根提取物的黃酮含量。 將葛根的乙醇提取物通過不同極性的溶劑萃取，濃縮后得粗提物，對各粗提物進行酪氨酸酶抑制率的測定，得到葛根的乙酸乙酯萃取物對酪氨酸酶的抑制作用最強。然后用常壓硅膠柱層析法對該萃取物作梯度洗脫，用硅膠G薄板進行TLC檢測，跟蹤洗脫情況，得到A～J共10個洗脫物，再分別對這些洗脫物進行酪氨酸酶抑制率的測定。從測定結(jié)果得到，從葛根中分離得到

4、兩個組分B和D對酪氨酸酶的抑制率較高，分別為65.7％和79.2％。對B進行第二次柱層析，得到了對酪氨酸酶抑制作用明顯的B3，它對酪氨酸酶的抑制率為92.3％。對D組分進行第二次柱層析后，得到對酪氨酸酶抑制作用最強的是D4，它對酪氨酸酶的抑制率達98.5％。 對B3和D4進行高效液相色譜、紫外色譜，液質(zhì)聯(lián)用色譜檢測，并與標準品對比，推斷大豆苷元和葛根素分別為中草藥葛根中的主要美白成分。 研究葛根提取物抑制酪氨酸酶活性的動