蒜渣多糖的提取純化及功能性研究.pdf

1、大蒜，多年生草本植物，百合科蔥屬。地下鱗莖分瓣，按皮色不同分為紫皮種和白皮種。辛辣，有刺激性氣味，可食用或供調(diào)味。蒜渣是大蒜提取過(guò)大蒜精油剩余的殘?jiān)?，現(xiàn)在的一般處理都是直接扔掉或者加到飼料添加劑中，造成一定的浪費(fèi)。本文主要研究了不同提取方法提取的蒜渣多糖;蒜渣多糖的純化、結(jié)構(gòu)信息的表征;多糖的抗氧化作用以及抑菌作用的研究。研究結(jié)果如下:
　　 1.對(duì)蒜渣中多糖提取進(jìn)行了研究，主要探討了水法提取和堿法提取工藝的優(yōu)化。通過(guò)單因素和響

2、應(yīng)曲面實(shí)驗(yàn)，確定了水法提取蒜渣中多糖的最優(yōu)工藝條件:料液比為1:5，提取溫度74.8℃和提取時(shí)間3.27h，此提取條件下，蒜渣中多糖提取率可達(dá)到10.62％，為了便于實(shí)驗(yàn)的操作，將優(yōu)化得到的最佳提取條件調(diào)整為:料液比為1:5，提取溫度為75℃，提取時(shí)間為3.3小時(shí)。在該條件下得到蒜渣多糖的提取率為10.36％，與模型評(píng)估相比，相對(duì)誤差為2.45％。通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)，確定了堿法提取蒜渣中多糖的最優(yōu)工藝條件:提取溫度35℃，料液比1:1

3、6，提取時(shí)間3h，堿液濃度1％，此提取條件下，蒜渣中多糖提取率可達(dá)到17.03％。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)堿法提取率要高于水法的提取率，但也造成了堿液的污染與浪費(fèi)。有待尋找更加高效，低污染的方法來(lái)提取蒜渣多糖，節(jié)約時(shí)間，降低陳本。
　　 2.對(duì)蒜渣多糖多糖脫蛋白工藝研究，主要探討了鹽酸法，三氯乙酸法和中性蛋白酶法脫除蒜渣多糖。三種方法都能夠很好的脫除蒜渣多糖中的蛋白質(zhì)。鹽酸法和三氯乙酸法操作比較的簡(jiǎn)單，但是蛋白質(zhì)的脫除率與酶法相對(duì)而言比較的

4、低，只能脫除多糖液中絕大多數(shù)的游離蛋白質(zhì)，很難脫除與多糖結(jié)合的一部分蛋白質(zhì)。酶法操作相對(duì)而言復(fù)雜一點(diǎn)，而且酶難以控制，但酶的活性比較的高，能夠脫除蒜渣多糖液中絕大多數(shù)的蛋白質(zhì)，為后面的分離純化提供了便利的條件，是目前多糖脫蛋白比較理想的方法。中性蛋白酶脫除蒜渣中多糖蛋白質(zhì)的最優(yōu)條件為:加酶量為1.25％、最佳酶解時(shí)間25min、最佳酶解溫度為50℃，在此條件下蛋白質(zhì)的最大脫除率為93.32％。
　　 3.蒜渣多糖的分離純化，利用

5、乙醇沉淀，DEAE-52以及SephadexG-100層析方法從蒜渣粗多糖中獲取純的蒜渣多糖。經(jīng)過(guò)薄層層析確定蒜渣多糖中的單糖主要由葡萄糖組成;經(jīng)過(guò)紫外可見(jiàn)光譜、紅外光譜、核磁共振分析，蒜渣多糖最可能的結(jié)構(gòu)為[α-D-Glc(1-4)-]n型葡聚糖。
　　 4.體外抗氧化性的研究，主要考查了蒜渣多糖對(duì)通過(guò)測(cè)定對(duì)DPPH·、超氧自由基、羥基自由基的清除能力以及對(duì)油脂的過(guò)氧化抑制能力。當(dāng)水提蒜渣多糖與DPPH·的質(zhì)量比為100的時(shí)候

6、，5min后就檢測(cè)不出自由基;當(dāng)堿提蒜渣多糖與DPPH·的質(zhì)量比為1.6的時(shí)候，5min后就檢測(cè)不出自由基。當(dāng)蒜渣水提多糖濃度為0.28mg/mL時(shí)，可以清除50％羥基自由基;當(dāng)蒜渣堿提多糖濃度為0.16mg/mL時(shí)，可以清除50％羥基自由基。當(dāng)蒜渣水提多糖濃度為0.44mg/mL時(shí)，可以清除50％的超氧自由基;當(dāng)蒜渣堿提多糖的濃度為0.2mg/mL時(shí)，可以清除50％的超氧自由基。同時(shí)蒜渣多糖對(duì)豬油和芝麻油的過(guò)氧化也有較好的抑制作用。<