多種信號放大生物技術(shù)在電化學(xué)適體傳感器中的應(yīng)用.pdf

1、獨創(chuàng)性聲明學(xué)位論文題目:多種信號放大生物技術(shù)在電化學(xué)適體傳感器中的應(yīng)用本人提交的學(xué)位論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中引用他人已經(jīng)發(fā)表或出版過的研究成果，文中己加了標(biāo)注。對本研究及學(xué)位論文撰寫曾做出貢獻(xiàn)的老師、朋友、同仁在文中作了明確說明并表示衷心感謝。學(xué)位論文作者:以均簽字日期:川5年5月予日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解西南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的

2、復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)西南大學(xué)研究生部可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書，本論文:口不保密，口保密期限至年月止)。學(xué)位論文作者簽名:弘均簽字日期:“)0I號年5月3日導(dǎo)師簽名:l盯在簽字曰期:hri年了月)日摘要多種信號放大生物技術(shù)在電化學(xué)適體傳感器中的應(yīng)用分析化學(xué)專業(yè)碩士研究生張純指導(dǎo)教授袁若教授摘要電化

3、學(xué)適體傳感器是一類將適體作為分子識別物質(zhì)和電化學(xué)信號傳導(dǎo)相結(jié)合的新穎的生物傳感器，在蛋白的檢測及疾病的早期診斷中發(fā)揮著重要的作用。它不僅具有適體對目標(biāo)分子的高親和力和高特異性，而且還具有電化學(xué)分析方法在靈敏、快速、簡單、活體檢測和低成本等方面的優(yōu)勢。近幾年來，為了提高適體傳感器對自標(biāo)分子檢測的靈敏度，多種信號放大技術(shù)被廣泛應(yīng)用于傳感器的研究中。因此，利用信號放大技術(shù)和電化學(xué)傳感技術(shù)，研制有效、可靠、高靈敏的適體傳感器有著十分重要的現(xiàn)實意

4、義。本文主要研究如下1.基于雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和HeminG叩ladruplex模擬酶構(gòu)建的仿雙酶凝血酶適體傳感器雙酶催化放大信號優(yōu)于單隅催化體系，本文通過雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)CHCR)在雙鏈DNA主形成大量具有仿雙酶作用的heminG叩ladruplex復(fù)合物，它可以同時作為NADH氧化酶和HRP模擬酶放大響應(yīng)信號，構(gòu)建了一個新穎、靈敏的適體傳感器用于凝血酶的檢測。在體系中，基于雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)生成長鏈DNA聚合物不僅能固載大量的電活性物質(zhì)亞甲基藍(lán)(M

5、B)，而且能在DNA現(xiàn)鏈上形成大量的hemin!G叩Iadruplex復(fù)合物。當(dāng)在檢測液中存在NADH時，heminG叩ladrup!ex首先作為NADH氧化酶將NADH氧化為NAD，接著又充當(dāng)過氧化氫模擬酶在MB的幫助下氧化還原H202，來提高M(jìn)B的響應(yīng)信號，從而提高傳感器的靈敏度。當(dāng)傳感器表面的凝血酶適體鏈捕獲樣品溶液中的目標(biāo)物蛋白攝血酶時，雙鏈DNA上的亞甲墓藍(lán)和hemin!G叩ladruplex復(fù)合物就會脫離傳感器表面，致使MB

6、的響應(yīng)電流值發(fā)生了改變。我們就可以根據(jù)電流值的變化定量的檢測凝血酶的濃度，該傳感器的線性范圍為0.01nmo!LI50nmolL斗，檢測限為2pmolL1。實驗結(jié)果表明，基于該信號放大技術(shù)構(gòu)建的適體傳感器具有良好的選擇性、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。從而為檢測提血酶提供了一種簡單、靈敏的方法。2.多孔二氧化硅修飾的多壁碳納米管和模擬酶雙重信號放大的凝血酶適體傳感器本立以多孔二氧化硅功能化的多里碳納米營(mSi02@MWCNT)作為多功能的載體和HR