球形紅細(xì)菌生物轉(zhuǎn)化槲寄生指紋圖譜及化學(xué)成分的研究.pdf

1、目的：研究不同產(chǎn)地槲寄生提取物經(jīng)球形紅細(xì)菌生物轉(zhuǎn)化前后的HPLC指紋譜圖及生物活性；研究球形紅細(xì)菌生物轉(zhuǎn)化槲寄生(PSBT)培養(yǎng)液正丁醇萃取部位的化學(xué)成分及其生物活性。
　　 方法：通過高效液相色譜法建立不同產(chǎn)地槲寄生經(jīng)球形紅細(xì)菌生物轉(zhuǎn)化后所得轉(zhuǎn)化液的HPLC指紋譜圖，與未轉(zhuǎn)化前槲寄生HPLC指紋圖譜進(jìn)行比較；采用MTT法測定其細(xì)胞毒活性，DPPH法測定其抗氧化活性。采用大孔吸附樹脂、硅膠、Sephadex LH-20、HPLC

2、等色譜方法對PSBT正丁醇萃取部位化學(xué)成分進(jìn)行分離、純化;利用理化性質(zhì)和波譜技術(shù)(UV、1H-NMR、13C-NMR)，在與文獻(xiàn)比較的基礎(chǔ)上對所分化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定；采用DPPH法測定其抗氧化活性；通過紫外光譜法、熒光光譜法研究所分化學(xué)成分之一高圣草素-7-O-β-D-芹糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷(HAG)與血清白蛋白(SA)的結(jié)合作用。
　　 結(jié)果：建立了PSBT指紋圖譜，三個產(chǎn)地的槲寄生經(jīng)球形紅細(xì)菌生物轉(zhuǎn)化后，抗氧化

3、活性升高，細(xì)胞毒活性升高，化學(xué)成分均發(fā)生了一定的變化，東北產(chǎn)地槲寄生變化最為明顯；從PSBT中分離得到8個化合物，分別為鼠李秦素-3-O-β-D-芹糖基-(1→2)-β-D-[6”-(3-羥基-3-甲基戊二酸甲酯)]-葡萄糖苷(Ⅰ)、鼠李秦素-3-O-β-D-芹糖基-(1→2)-β-D-[6”-(3-羥基-3-甲基戊二酸半酯)]-葡萄糖苷(Ⅱ)、異鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅲ)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)、高圣草素(

4、Ⅴ)、高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)、高圣草素-7-O-β-D-芹糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ)、高圣草素-7-O-β-D-芹糖基-(1→5)-β-D-芹糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(Ⅷ)。其中化合物Ⅰ為新化合物，化合物Ⅳ未有從槲寄生屬植物中分離得到的報道，可能為轉(zhuǎn)化得新成分；抗氧化實驗結(jié)果表明：化合物Ⅰ～Ⅷ均具有一定的抗氧化活性；熒光光譜結(jié)果表明：HAG對BSA和HSA的內(nèi)源熒光均有顯著的猝滅作用，且猝滅機(jī)理

5、主要為靜態(tài)猝滅。HAG與BSA和HSA的結(jié)合常數(shù)K分別為3.03×104 L·mol-1和6.22×104 L·mol-1，結(jié)合位點數(shù)n分別為0.858和0.911，結(jié)合距離r分別為2.88 nm和3.09 nm，其作用力以氫鍵和范德華力為主。同步熒光結(jié)果表明：HAG對BSA和HSA的構(gòu)象均產(chǎn)生了一定的影響。
　　 結(jié)論：通過對各產(chǎn)地PSBT指紋圖譜、細(xì)胞毒活性和抗氧化活性的比較研究，為PSBT所用槲寄生的固定產(chǎn)地、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)