川產(chǎn)中柴2號主要化學(xué)成分及指紋圖譜研究.pdf

1、柴胡作為我國傳統(tǒng)常用中藥，藥用歷史悠久。在2015年版的《中華人民共和國藥典》中收錄的柴胡原植物有兩種，即北柴胡（Bupleurum chinense DC.）和狹葉柴胡（Bupleurum scorzonerifolium Willd.）。柴胡苦辛微寒，具有解熱、退熱、抗菌、抗病毒、解除胸悶脹痛的作用。柴胡屬植物廣泛分布在我國各地，除海南省未見報道外，其他各省均有柴胡屬植物分布，近些年來，四川廣元和綿陽已逐漸成為柴胡的主要產(chǎn)地。本研究

2、分析了川產(chǎn)北柴胡中柴2號中柴胡皂苷、黃酮、多糖等成分含量并建立中柴2號的HPLC和GC指紋圖譜，為中柴2號藥材質(zhì)量評價、品種鑒別及其入藥提供科學(xué)依據(jù)。主要結(jié)果如下：
　　通過對中柴2號樣品預(yù)處理?xiàng)l件、檢測條件、洗脫條件的優(yōu)化，流動相、色譜柱的選擇，確定了柴胡皂苷與黃酮類成分測定的最終色譜條件為Hypesil GOLD色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相為乙腈（A）-0.1％磷酸水溶液（B）；梯度洗脫程序（0～5min，

3、10%A～30%A；5min～25min，30%A～70%A）；流速為0.8mL·min-1；柱溫檢測為常溫（30℃），進(jìn)樣量10μL，運(yùn)行時間25min，檢測波長210nm。
　　采用HPLC法測定中柴2號中皂苷與黃酮類成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)中柴2號地下部分中含有柴胡皂苷a、柴胡皂苷c和柴胡皂苷d，且柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量總和均大于0.30%，高于2015年版《中國藥典》柴胡藥材含量測定項(xiàng)下的最低限度規(guī)定，最高可達(dá)1.01%；地下部

4、分僅含有少量的黃酮類成分。中柴2號地上部分中含有少量柴胡皂苷a和柴胡皂苷d，其和最高為0.10%；地上部分含有較多的黃酮類成分，其含量最高為0.68%。采用紫外-可見分光光度法測定中柴2號中總皂苷、總黃酮和多糖含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)中柴2號地上部分柴胡總皂苷含量為0.26%～0.82%，總黃酮含量為0.81%～2.76%，可溶性多糖含量為0.996～3.859mg·g-1，粗多糖含量為6.032～10.632mg·g-1，總多糖含量最高可達(dá)12

5、.837mg·g-1。地下部分柴胡總皂苷含量為1.05%～2.12%，總黃酮含量為0.18%～0.46%，可溶性多糖含量為2.118～13.809mg·g-1，粗多糖含量為7.153～20.257mg·g-1，總多糖含量最高可達(dá)28.992mg·g-1。
　　中柴2號地上部分總皂苷含量在8、9月份達(dá)到最高值，10、11月份總皂苷含量降低，地下部分在總皂苷含量在7、8月份達(dá)到最高值，9、10、11月后總皂苷含量逐漸降低；中柴2號地上

6、部分總黃酮含量在8、9月份達(dá)到最高值，10、11月份逐漸降低，中柴2號地下部分總黃酮含量在7、8月份達(dá)到最高值，9、10、11月后逐漸降低；中柴2號地上部分及地下部分總多糖含量從7月份至11月份基本呈上升趨勢。
　　10批中柴2號樣品HPLC及GC色譜圖導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》，HPLC指紋圖譜匹配10個共有峰并確定柴胡皂苷a、柴胡皂苷c和柴胡皂苷d三個有效成分，共有峰相對保留時間RSD值在0.18%～0.70%之間

7、，共有峰相對峰面積RSD值在20.95%～101.05%之間；GC指紋圖譜匹配12個共有峰，共有峰相對保留時間RSD值在0.04%～0.32%之間，共有峰相對峰面積RSD值在20.67%～88.92%之間，結(jié)果表明10批柴胡主要成分基本相同，但各成分含量差異較大，即相同品種不同產(chǎn)區(qū)川產(chǎn)柴胡各化學(xué)成分的含量有明顯差別。
　　中柴2號HPLC指紋圖譜相似度結(jié)果表明各批柴胡樣品與對照指紋圖譜的相似度在0.39%～0.97%之間，其它各樣

8、品間的相似度在0.05%～0.95%之間；中柴2號GC指紋圖譜相似度結(jié)果表明各批柴胡樣品與對照指紋圖譜的相似度在0.76%～0.99%之間，其它各樣品間的相似度在0.33%～0.98%之間。雖然各批柴胡樣品基源相同，但由于生長環(huán)境不同，指紋圖譜相似度也有所不同。
　　本課題通過對四川種植基地10批柴胡中柴2號指紋圖譜的研究，建立了川產(chǎn)柴胡中柴2號HPLC與GC指紋圖譜分析方法，將中柴2號柴胡皂苷成分與揮發(fā)油成分的共有峰信息分別在G