GPR30激活對小鼠TG神經(jīng)元T型鈣離子通道的作用及機制的研究.pdf

1、目的：研究GPR30對小鼠三叉神經(jīng)節(jié)(TG)神經(jīng)元中T-型鈣通道電流的作用及相關(guān)機制。
　　方法：分離雌性小鼠三叉神經(jīng)節(jié)(TG),采用分子生物學的方法(PCR和Western Blotting)鑒定TG上GPR30的表達,利用全細胞膜片鉗技術(shù)研究GPR30經(jīng)其特異性激動劑G-1激活后對小直徑的TG神經(jīng)元中T型鈣通道電流的作用,并用藥理學方法研究它的信號通路作用機制。
　　結(jié)果：⑴不論是在mRNA水平,還是在蛋白水平,雌性小鼠

2、三叉神經(jīng)節(jié)上都有GPR30的表達。⑵電生理的研究結(jié)果表明,GPR30特異性激動劑G-1對三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元上的T-型鈣通道電流的增強作用具有劑量依賴關(guān)系,100 nM G-1對T-型鈣通道電流的增長率約為26.9％。⑶藥理學研究發(fā)現(xiàn), G-1對T-型鈣通道電流的增強作用可以被GDP-β-S(特異性蛋白活性抑制劑)、CTX(霍亂毒素)所阻斷,表明G-1是通過Gsα發(fā)揮作用。將TG神經(jīng)元用蛋白激酶A(PKA)抑制劑H89預(yù)孵育,或者在內(nèi)液中加