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1、安絡(luò)小皮傘是傳統(tǒng)藥食兼用真菌,具有食品保健及藥用價(jià)值。本文通過控制試驗(yàn)方法優(yōu)化安絡(luò)小皮傘菌有效物質(zhì)—真菌多糖的提取工藝,并且檢測(cè)安絡(luò)小皮傘菌發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)硝酸甘油型大鼠偏頭痛模型的鎮(zhèn)痛效應(yīng)。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴以安絡(luò)小皮傘菌絲體為研究對(duì)象,優(yōu)化其多糖超聲波提取工藝。試驗(yàn)先通過單因素實(shí)驗(yàn)初步確定小皮傘多糖提取最優(yōu)條件,然后用響應(yīng)面法建立數(shù)學(xué)模型。通過軟件分析,提取最優(yōu)條件為超聲處理時(shí)間26.43 min、超聲處理功率465.01
2、W、料液比254.28g/L。⑵對(duì)安絡(luò)小皮傘菌胞外多糖的醇沉條件進(jìn)行了優(yōu)化,首先優(yōu)選出最佳發(fā)酵液濃縮比,最佳醇沉?xí)r間,最佳加入乙醇量,又通過三水平三因素的響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì),以發(fā)酵所得的生物量和胞外粗多糖含量為指標(biāo),得到了安絡(luò)小皮傘菌胞外多糖分離純化的最佳醇沉條件,即為:濃縮體積比0.29、添加乙醇與發(fā)酵液的體積比5.20、醇沉?xí)r間12.34 h。在此條件下多糖質(zhì)量可達(dá)6g/L。⑶以安絡(luò)小皮傘菌絲體、發(fā)酵液、安絡(luò)通痛制劑、皮傘堿對(duì)由硝酸甘油
3、誘導(dǎo)的偏頭痛大鼠進(jìn)行不同劑量的灌胃給藥,采集靜脈血及腦干,檢測(cè)大鼠靜脈血和腦干中NOS和NO含量。結(jié)果顯示安絡(luò)小皮傘菌絲體組、發(fā)酵液組、安絡(luò)痛組等都能顯著地抑制模型大鼠機(jī)體內(nèi)NO及NOS的含量,效果略差于西藥組,反應(yīng)出臨床上安絡(luò)通鎮(zhèn)痛作用遲緩這一特點(diǎn)。皮傘堿組效果不顯著。⑷以安絡(luò)小皮傘菌絲體、發(fā)酵液、安絡(luò)痛制劑及皮傘堿對(duì)由硝酸甘油誘導(dǎo)的偏頭痛大鼠進(jìn)行不同劑量的灌胃給藥,采集靜脈血及腦干,檢測(cè)大鼠靜脈血和腦干中CGRP和β-EP含量,實(shí)驗(yàn)
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