基于信號(hào)放大的生物傳感器在生化分析中的應(yīng)用.pdf

1、表面增強(qiáng)拉曼（SERS）和表面等離子體共振技術(shù)（SPRi）是最近幾年剛興起的兩種檢測(cè)方法，干擾性小、檢測(cè)速度快、靈敏性好等優(yōu)點(diǎn)使得它們快速發(fā)展。本研究利用這兩種新穎的檢測(cè)方法結(jié)合雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、聚合酶循環(huán)放大技術(shù)和納米材料技術(shù)，構(gòu)建了幾種能有效檢測(cè)離子和蛋白質(zhì)的分析方法。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴基于靶標(biāo)汞離子引發(fā)的雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和納米生物條碼的放大技術(shù)，以表面增強(qiáng)拉曼作為檢測(cè)手段，設(shè)計(jì)了一種檢測(cè)汞離子的方法。首先利用T-Hg2+-

2、T的穩(wěn)定結(jié)合作用，將靶標(biāo)分子Hg2+引入，然后利用雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)為拉曼信號(hào)分子的結(jié)合提供大量位點(diǎn)，生物條碼中納米材料的應(yīng)用保證了大量信號(hào)分子的附著，最后利用生物素-鏈霉親和素的強(qiáng)相互作用，將信號(hào)分子引入到磁珠上，通過(guò)檢測(cè)磁珠上拉曼信號(hào)分子的強(qiáng)度，實(shí)現(xiàn)對(duì)Hg2+的有效檢測(cè)。此方法新穎，簡(jiǎn)單，有創(chuàng)新性，為檢測(cè)環(huán)境中的Hg2+提供了一種新的方法。⑵構(gòu)建了一種將生物納米材料與雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)相結(jié)合，利用SPR檢測(cè)Hg2+的方法。利用T-Hg2+-T的

3、特殊結(jié)構(gòu)，將兩條錯(cuò)配的DNA與Hg2+相結(jié)合，在雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)與生物納米材料的雙重放大作用下，利用納米材料與等離子的耦合作用與增重效應(yīng)，可以增強(qiáng)SPR的信號(hào)值，實(shí)驗(yàn)中的檢測(cè)到的最低濃度1.0×10-10 M。此方法可以快速、有效、高選擇性地檢測(cè)Hg2+，為定量檢測(cè)重金屬離子打開(kāi)了新思路。⑶此方案充分利用聚合酶的放大作用與生物納米材料的表面增強(qiáng)等離子效應(yīng)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)凝血酶的檢測(cè)。利用凝血酶與適體的特異性相互作用，將定量的凝血酶轉(zhuǎn)換為易于操作的