基于APTES和蛋白A聯(lián)合固定化技術(shù)的乙肝病毒免疫生物傳感器敏感膜的制作研究.pdf

1、穩(wěn)定、高效的生物微納免疫傳感器在食品領(lǐng)域、環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域及醫(yī)療診斷領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。生物傳感器敏感膜固定化技術(shù)是生物傳感器的關(guān)鍵核心技術(shù)。傳統(tǒng)敏感膜固定方法(吸附法、共價結(jié)合法、交聯(lián)法以及包埋法等)漸趨成熟，但普遍存在固定生物分子失活，效價不高的問題。生物大分子定向固定可以提高生物材料固定的有效性，但是卻存在牢固性和可重用性差等問題。
　　 針對上述問題，本文以乙肝免疫生物傳感器敏感膜固定化技術(shù)研究為切入點(diǎn)，首先，提出了將傳統(tǒng)化學(xué)共

2、價結(jié)合和生物大分子定向固定化方法結(jié)合的生物傳感器敏感膜固定化技術(shù)，它既利用了化學(xué)共價固定法的固定牢固性和特異性。又利用了蛋白A定向固定的抗空間位阻性和有效性高的特性。文中的化學(xué)共價修飾采用了能夠有效控制修飾的APTES硅烷化固定方法，并實(shí)現(xiàn)了對于基底膜性質(zhì)的有效控制。其次，為進(jìn)一步提高傳感器靈敏度等方面的性能，我們對固定化界面進(jìn)行了納米材料的修飾，通過控制材料表面納米顆粒的大小、性質(zhì)及反應(yīng)條件，有效控制了納米材料的納米層面上的性質(zhì)。進(jìn)而

3、有效利用了修飾材料的納觀效應(yīng)。為驗(yàn)證上述固定化方法的有效性，我們通過接觸角(WCA)傅里葉變換紅外線光譜(FTIR)檢測等實(shí)驗(yàn)方法定性驗(yàn)證了敏感膜的修飾結(jié)果，并用原子力顯微鏡對修飾過程進(jìn)行了形貌學(xué)表征。
　　 首先，通過對比分析研究在經(jīng)過或未經(jīng)過APTES硅烷化修飾的硅片上固定蛋白A的效果，證明了APTES硅烷化修飾的優(yōu)越性；其次，分析比較了通過APTES硅烷化納米顆粒修飾后僑聯(lián)蛋白A或不僑聯(lián)蛋白A的兩種方法，進(jìn)一步證明蛋白A對