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文檔簡介
1、黃酮和精油是具有廣泛應用前景的天然植物提取物,為促進枇杷花的綜合利用,本論文以枇杷花干花為原料,對枇杷花黃酮的提取、純化、產(chǎn)品成分和體外抗氧化活性進行了研究,并建立了枇杷花黃酮、精油提取工藝流程。
本研究采用超聲波輔助法提取枇杷花黃酮,在單因素實驗的基礎上,利用響應面法優(yōu)化枇杷花黃酮提取工藝,其最佳提取工藝為:乙醇濃度64%,料液比1:44,提取溫度59℃,提取時間38 min,在此條件下,枇杷花黃酮提取量為106.422
2、 mg/g。超聲波輔助提取法比傳統(tǒng)浸提法的黃酮提取量高,且提取時間較短,從時間、能耗及操作環(huán)境等方面考慮,采用超聲波輔助提取法進行后續(xù)實驗。
研究采用大孔吸附樹脂法分離純化枇杷花黃酮,通過靜態(tài)、動態(tài)吸附和解吸實驗,從8種不同型號的大孔吸附樹脂中篩選出AB-8和D101兩種吸附率和解吸率均較好的樹脂,在此基礎上對這兩種樹脂進行靜態(tài)吸附和解吸動力學實驗研究,最終選取吸附效果最佳的AB-8樹脂用作后續(xù)純化工藝實驗的優(yōu)化;通過研究
3、上樣液濃度、pH、洗脫劑濃度、洗脫液pH、上樣速度及洗脫速度對AB-8樹脂吸附和解吸性能的影響,確定了AB-8大孔吸附樹脂純化枇杷花黃酮的最佳工藝條件為:上樣液濃度為3.5 mg/mL,pH值為4.0,上樣流速為3 BV/h,pH值6.0的60%乙醇溶液為洗脫劑,洗脫流速為2.5 BV/h。在此條件下,柱層析所得黃酮含量達到68.57%。
顏色反應結果表明枇杷花黃酮中可能含有黃酮、二氫黃酮和二氫黃酮醇類物質、查耳酮及異黃酮
4、類物質;紫外-可見光譜分析結果表明枇杷花黃酮甲醇溶液在紫外光區(qū)有兩個吸收峰,分別位于283 nm和326 nm處,這種譜帶與二氫黃酮和二氫黃酮醇類物質的譜帶相似,表明枇杷花黃酮可能含有二氫黃酮和二氫黃酮醇類物質;紅外光譜分析結果表明,枇杷花黃酮的紅外光譜圖和蘆丁標準品的紅外光譜圖相似度極高,同時通過對枇杷花黃酮各個吸收峰的分析結果表明,枇杷花黃酮為含有芳環(huán)結構、并含有雜環(huán)羧基、飽和亞甲基結構的酸性酚類物質,即可能為二氫黃酮和二氫黃酮醇類
5、物質。
研究以抗壞血酸為對照,采用分光光度法對枇杷花黃酮清除二苯代苦味?;杂苫?DPPH·)、超氧陰離子自由基(O-2·)、羥自由基(·OH)等三種自由基能力進行檢測,考查枇杷花黃酮的體外抗氧化活性。結果表明,枇杷花黃酮對O2-·和-OH的最大清除率均達到80%以上,IC50值分別為4.5386 mg/mL和2.5327 mg/mL,與對照品Vc的清除效果相當,表明枇杷花黃酮具有較強的O2-·和.OH的清除能力;枇杷花黃
6、酮對DPPH·的清除能力相對較弱,其最大清除率在70%以上,IC50值為0.1615 mg/mL,在較低濃度下就能達到較高的清除效果,表明枇杷花黃酮同時具有較強的DPPH·清除能力;綜合枇杷花黃酮對三種自由基的清除能力,表明枇杷花黃酮有較強的抗氧化活性。
研究采用超聲波輔助萃取枇杷花精油,在單因素實驗的基礎上,采用正交設計優(yōu)化枇杷花精油提取工藝,其最佳提取工藝條件為:溶劑用量200 mL,提取時間60 min,提取次數(shù)3次
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